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利用可見光等測(cè)定物質(zhì)的吸收光譜，利用此光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析和物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的方法，稱為分光光度法，使用的儀器是分光光度計(jì)。可見分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束分光光度計(jì)，是生物化學(xué)研究中*的基本手段之一。可見分光光度計(jì)的工作原理是：
當(dāng)一束單色光照射待測(cè)物質(zhì)的溶液時(shí)，當(dāng)某一定頻率（或波長(zhǎng)）的可見光所具有的能量（hf）恰好與待測(cè)物質(zhì)分子中的價(jià)電子的能級(jí)差相適應(yīng)（即ΔE=E2-E1=hf）時(shí)，待測(cè)物將對(duì)該頻率（波長(zhǎng)）的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見分光光度計(jì)可以測(cè)量和記錄其吸收程度（吸光度）。由于在一定條件下，吸光度A與待測(cè)物質(zhì)的濃度C及吸收地長(zhǎng)度l的乘積成正比，即A＝ KCL，所以，在測(cè)得吸光度 A后，可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。
當(dāng)一束單色光照射待測(cè)物質(zhì)的溶液時(shí)，當(dāng)某一定頻率（或波長(zhǎng)）的可見光所具有的能量（hf）恰好與待測(cè)物質(zhì)分子中的價(jià)電子的能級(jí)差相適應(yīng)（即ΔE=E2-E1=hf）時(shí)，待測(cè)物將對(duì)該頻率（波長(zhǎng)）的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見分光光度計(jì)可以測(cè)量和記錄其吸收程度（吸光度）。由于在一定條件下，吸光度A與待測(cè)物質(zhì)的濃度C及吸收地長(zhǎng)度l的乘積成正比，即A＝ KCL，所以，在測(cè)得吸光度 A后，可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。
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