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由于蛋白質(zhì)分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)含有共軛雙鍵，因此蛋白質(zhì)具有吸收紫外線的性質(zhì)，吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)溶液的光吸收值（OD280）與其含量呈正比關系，可用作定量測定。
利用紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量的優(yōu)點是民迅速、簡便、不消耗樣品，低濃度鹽類不干擾測定。因此，在蛋白質(zhì)和酶的生化制備中（特別是在柱層析分離中）得到廣泛應用。
此法的缺點是：（1）對于測定那些與標準蛋白質(zhì)酪氨酸和色氨酸含量差異較大的蛋白質(zhì)，有一定的誤差；（2）若樣品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外線的物質(zhì)，會出現(xiàn)較大的干擾。根據(jù)蛋白質(zhì)和核酸的吸收高峰不同，并利用這一性質(zhì)，通過計算可以適當校正核酸的干擾作用。
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