在腫瘤早期篩查研究領域,循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)一直是各大廠商、科研工作者關注的重點。雖然ctDNA的應用日趨成熟,但總有一些微量的ctDNA樣本無法用傳統(tǒng)技術完成高品質文庫的構建,特別是在進行腫瘤早期診斷有重要價值的稀有突變分析時。 如何以微量ctDNA起始構建可準確分析稀有突變的文庫?Takara的解決方案是引入分子標簽技術! |
■ 微量ctDNA樣本無法準確分析稀有變異? 自帶1600萬分子標簽的建庫技術了解一下 |
ThruPLEX Tag-Seq Kit是Takara推出的采用莖環(huán)形接頭,含1600萬種分子標簽的DNA-Seq文庫構建技術,足以準確區(qū)分是測序錯誤還是真實的稀有突變! |
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同時,該產品支持1-50 ng cfDNA起始,微量樣本的文庫構建不再是難題! ThruPLEX單管操作、手動15 min、總共兩小時,過程中無需轉管與純化,實驗小白也能輕松上手! |
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● 實驗案例 |
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分別以10 ng及30 ng的cfDNA標準樣品(Horizon Diagnostics)起始,使用ThruPLEX Tag-seq kit制備文庫,然后使用Agilent SureSelect靶向序列富集系統(tǒng)定制Panel(110 KB),或Roche的NimbleGen SeqCap EZ定制Panel(240 KB)進行富集,使用illumina的NGS平臺進行測序。得到的數(shù)據(jù)使用Curio(Curio Genomics)分析。 |
使用Agilent (30 ng DNA input)或Roche(10 ng DNA input)兩者中的任意一個靶向富集系統(tǒng)時,可以得到與已知的MAF(Minor Allele Frequency)同等的結果。 |
(數(shù)據(jù)來源于Takara Bio USA, Inc.) |
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● 實驗友好型的ctDNA稀有突變分析方案 |
可能有些剛開展ctDNA稀有變異分析項目的朋友會有所擔心,即便能簡便快捷地構建NGS文庫,但后期如果沒有易用的生信分析流程,一樣會成為項目研發(fā)的阻礙。 |
No Worries!以下三款生信分析工具,搭配ThruPLEX Tag-Seq使用,效果更佳! |
Connor:GitHub平臺上一款開放型的生信工具,可以處理ThruPLEX Tag-Seq文庫的測序數(shù)據(jù)。Connor可以aligned BAM文件作為輸入量,分析分子標簽信息,并生成含對應序列的BAM文件,后續(xù)可結合突變分析軟件進行分析,如FreeBayes等。
重慶市華雅干細胞技術有限公司擁有takara旗下Clontech代理商,正品現(xiàn)貨,歡迎咨詢!
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