2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride，TTC)，分子量為334.80，分子式為 C₁₉H₁₅ClN₄，CAS 號(hào)為 298-96-4。 TTC 是脂溶性光敏感復(fù)合物，初用于檢測(cè)種子生存能力，后來(lái)用于染色檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。TTC 是呼吸鏈中吡啶核苷結(jié)合酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，TTC 與正常組織中的呼吸酶反應(yīng)而呈紅色，而缺血組織內(nèi)呼吸酶活性下降，不能反應(yīng)，故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白色，該染色是一種用于評(píng)價(jià)組織內(nèi)脫氫酶活性的大體染色方法。

    紅四氮唑溶液（2%）對(duì)心肌梗死及腦組織壞死區(qū)的觀測(cè)較電鏡早 3～6h，較光鏡早 24h，多用于尸檢中的新鮮心臟組織和腦組織以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型早期梗死組織的染色。其特點(diǎn)：①TTC 染色直接取材于新鮮組織即可染色，無(wú)需固定、包埋等步驟；②TTC 染色時(shí)間短，一般 20~30min；③紅四氮唑溶液（2%）可重復(fù)使用，10ml 可染 20 張片子。

自備材料：

1、生理鹽水

2、低溫冰箱

3、4%多聚甲醛或 10%中性福爾馬林

操作步驟(僅供參考)：

(一)腦組織染色

1、取待檢新鮮腦組織樣本(一般可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦)，取出后-20℃速凍 20～30min，便于切片。

 2、將待檢腦組織切片，一般動(dòng)物樣本層厚 2～3mm，人的樣本層厚 3～5mm，可連續(xù)切4～5 張。一刀在腦前極與視交叉連線中點(diǎn)處；第二刀在視交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間(參考:張均田主編，現(xiàn)代藥理試驗(yàn)方法)。

3、切片入 紅四氮唑溶液（2%），避光浸染 30～35min。

4、切片入 4%多聚甲醛或 10%中性福爾馬林中固定 4～24h。

5、吸干組織表面清水，應(yīng)用 IPP 等圖像分析系統(tǒng)測(cè)量腦梗死面積并計(jì)算大腦梗死體積。

(二)種子染色

1、取不同活力的種子用刀片做橫切和沿種胚中央準(zhǔn)確縱切，取每粒種子的一半備用。

2、將上述種子置于 紅四氮唑溶液（2%）中，37℃避光孵育 20min。

3、倒出染色液，自來(lái)水沖洗 2-3 次，立即觀察種胚著色的情況。

 染色結(jié)果：

注意事項(xiàng)：

1、 紅四氮唑溶液（2%）對(duì)人體有輕微刺激性，請(qǐng)注意小心防護(hù)。

2、取腦時(shí)應(yīng)仔細(xì)保持大腦的完整性。

3、如果染色效果不佳，應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。

4、樣本越新鮮越好，為了防止正常心肌及腦組織的酶活性減弱或消失，應(yīng)盡快染色。

5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

6、僅供科研實(shí)驗(yàn)使用；不得用于臨床診斷等用途。

有效期： 6 月有效。