單細(xì)胞分離可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來,然后移到合適的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),分離法對操作技術(shù)有比較高的要求,多限于高度專業(yè)化的科學(xué)研究中采用。
它不僅僅可以用于分離單細(xì)胞,還可以用于nl級(jí)別試劑的分配和磁珠的分選,對于單細(xì)胞測序領(lǐng)域有著很大的幫助??焖俑咝Ы臃N單個(gè)活細(xì)胞至微孔板細(xì)胞分離系統(tǒng)的主要功能為高效柔和地分離或分選活的單細(xì)胞,該系統(tǒng)通過微流控技術(shù)柔和地形成細(xì)胞液滴,同時(shí)利用白光和熒光成像實(shí)時(shí)分析細(xì)胞數(shù)量和熒光強(qiáng)度。
該系統(tǒng)通過微流控技術(shù)柔和地形成細(xì)胞液滴,同時(shí)利用白光和熒光成像實(shí)時(shí)分析細(xì)胞數(shù)量和熒光強(qiáng)度,將符合要求的單細(xì)胞液滴準(zhǔn)確接種至96孔板或384孔板等微孔板中,分離過程中避免液體剪切力、電壓、超聲等影響,以維持高細(xì)胞活率,減少對細(xì)胞的脅迫壓力,便于后續(xù)培養(yǎng)或分析,主要應(yīng)用包括細(xì)胞株開發(fā)、稀有細(xì)胞分離、單細(xì)胞基因組測序和單細(xì)胞RNA測序等。
細(xì)胞分離可代替?zhèn)鹘y(tǒng)的有限稀釋法,高效地將單個(gè)活細(xì)胞接種至微孔板中,得益于分離系統(tǒng)的高效率和高活率,可以將每塊微孔板中可獲得的單克隆細(xì)胞團(tuán)提高至8塊,從而在相同的工作量下可篩選更多的細(xì)胞克隆,從中發(fā)現(xiàn)更多更優(yōu)質(zhì)的細(xì)胞株。單細(xì)胞分離過程中記錄的連續(xù)5張圖像,可以與后續(xù)的孔板成像的圖像證據(jù)互相補(bǔ)充,從而提高單克隆性的可信度。
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