產(chǎn)品簡介：

GUS(β-Galactosidase)基因是存在于 E.coli 等一些細菌基因組內(nèi)的編碼β-葡萄糖苷酸

酶的一種水解酶，該基因常作為融合標記用于植物轉(zhuǎn)基因分析和調(diào)控研究中。GUS 受體基

因系統(tǒng)有表達 E.coli GUS 酶的穩(wěn)定性和在植物內(nèi)的低活性，絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄

糖苷酸酶的背景活性，以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物，其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。

5-Bromo-chloro-3-indolyl β-D-glucuronide，cyclohexylammonium salt(簡稱為

X-Gluc 或 X-GlcA)分子量為 521.8，CAS 號為 18656-96-7，是檢測大腸桿菌中 GUS 基因

的底物，可快速檢測植物中 GUS 基因融合標記。

GUS 染色液(即用型)又稱β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-Galactosidase

Reporter Gene Staining Kit)簡稱為 GUS 染色液，其染色原理是適宜的反應(yīng)條件下β-葡萄

糖苷酶(GUS)可將 X-Gluc 水解成藍色物質(zhì)，該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細胞核組織中的靛藍

物質(zhì)，具有 GUS 活性的部位或位點呈現(xiàn)藍色或藍色斑點，可用肉眼或顯微鏡觀察到，GUS

染色液可用于生物化學(xué)活性分析、免疫分析以及組織和細胞的組織化學(xué)染色，多用于轉(zhuǎn)基因

植物的 GUS 基因表達分析，該即用型試劑比常規(guī) GUS 染色液操作簡便。該試劑僅用于科

研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

名稱                                           50ml            100ml

試劑(A): X-Gluc                         1 支             2 支 

試劑(B): X-Gluc Solution          1ml             2×1ml 

試劑(C): GUS Buffer                   50ml          100ml 

使用說明書                             1 份

自備材料：

1、 70%乙醇

2、 去離子水

3、小瓶或多孔板、顯微鏡

GUS 染色液（即用型）操作步驟(僅供參考)：

1、配制 X-Gluc 溶液(50x)：取 1ml X-Gluc Solution *加至 1 支 X-Gluc 中，充分溶解，

即獲得 X-Gluc 溶液(50x)。配制好的 X-Gluc 溶液(50x)-20℃保存，1 個月有效。

2、配制 X-Gluc 染色液：取適量的 X-Gluc 溶液(50x)和 GUS Buffer，按 1：49 比例充分

混勻，配制成 X-Gluc 染色液，如取 0.2ml X-Gluc 溶液(50x)加入到 9.8ml GUS Buffer 中，

即配成 10ml GUS 染色液，該染色液現(xiàn)用現(xiàn)配，短期貯存可以 4℃保存 3 天。

3、取適量待染葉片等組織加入適量 GUS 染色液使其*浸沒組織。

4、37℃孵育 1~24h，隨著孵育時間的延長，藍色漸漸出現(xiàn)，當表達量較高時 GUS 活性的

部位或位點呈現(xiàn)藍色或藍色斑點。

5、用 70%乙醇脫去樣本的葉綠素，一般樣本浸沒于乙醇 1～3h，至陰性對照呈白色。如有

必要可重復(fù)該脫色步驟，以便*清除葉綠素；樣本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光學(xué)顯

微鏡下觀察，白色背景上的藍色即為 GUS 表達位點。

注意事項：

1、 GUS 染色液冰上配制，可以 4℃避光保存 3 天。

2、 由于組織特異性等原因，藍色顏色反應(yīng)可能不*一致，應(yīng)注意摸索具體實驗條件。

3、 擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗根就可直接染色；煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉

須在染色前切成薄片(1~3mm)。

4、 當操作大的組織和樣品時可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞，建議采購常規(guī)

GUS 染色液(DP0011)。

5、 GUS 染色液(即用型)染色靈敏度較好，但有時會出現(xiàn)非特異性反應(yīng)(即假陽性)，如非特

異性反應(yīng)較明顯，建議采購常規(guī) GUS 染色液(DP0011)。

GUS 染色液（即用型）有效期： 6 個月有效。