ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的試驗(yàn)診斷方法。雖然ELISA試劑盒的操作過程看似簡單，但沒做到位的話就會(huì)影響試驗(yàn)的作用。所以ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí)至關(guān)重要的過程有：

di一、重要的洗刷：

不充分的洗刷會(huì)導(dǎo)致差異和高布景，然后帶來不理想的試驗(yàn)結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會(huì)添加布景噪音。有必要的話，可添加洗刷液中的鹽濃度，這會(huì)阻撓非特異結(jié)合反響。假如布景過高，置疑洗刷不行時(shí)，能夠測驗(yàn)添加洗刷次數(shù)。

第二、抗體濃度須優(yōu)化：

假如試劑稍有不同，則或許需求優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會(huì)添加布景。為了防止這一點(diǎn)，切勿運(yùn)用過多的一抗或二抗。

第三、要害的關(guān)閉：

關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占有微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就下降了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的時(shí)機(jī)。假如布景過高，置疑關(guān)閉不充分，ELISA試劑盒那么能夠測驗(yàn)運(yùn)用更高濃度的關(guān)閉液，或恰當(dāng)延長關(guān)閉時(shí)間。
現(xiàn)在主要有兩種類型的關(guān)閉液：蛋白和非離子型去污劑。運(yùn)用的類型須取決于多個(gè)因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關(guān)閉液應(yīng)下降非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑產(chǎn)生相互作用。

第四、檢測試劑要適量：
切勿運(yùn)用過多的檢測試劑。假如濃度過高，或者未正確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高布景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)參加終止液。
只要保證每一步操作都做到位，ELISA試劑盒才會(huì)出現(xiàn)完美的試驗(yàn)結(jié)果。所以elisa試驗(yàn)的每一步都很重要，不能夠掉以輕心。

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