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人血管平滑肌細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)和懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞處理方法
人血管平滑肌細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)和懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞處理方法：
貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞：
1、貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶發(fā)貨，收到細(xì)胞后，拆開自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒。
2、消毒后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)，并拍下細(xì)胞照片。
3、將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境。
4、平衡后將T25瓶中培養(yǎng)基吸出用離心管裝好備用。
5、如細(xì)胞密度高于80%，可以直接消化傳代，相反則加入5-6mL培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。
懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞：
1、懸浮細(xì)胞發(fā)貨復(fù)蘇后用離心管發(fā)貨，拆開包裝離心管的自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒。
2、然后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)。
3、將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上。
4、平衡完成后，離心收集細(xì)胞，棄上清。
5、用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
人血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
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