可在母種試管灌入無(wú)菌液體石蠟,注入量以浸沒(méi)斜面上方1厘米左右為宜,使菌絲與空氣隔絕,降低活力容。然后棉塞處包扎薄膜,棉塞向上直立放于干燥器中(室溫)或4℃的冰箱中保藏,一般可以保藏1~2年。
化學(xué)純的液體石蠟:在121℃下高溫滅菌30分鐘,再將液體石蠟在160℃烘箱中保溫1~2小時(shí),蒸發(fā)掉液體石蠟中的水分?;?qū)⒏邏簻缇蟮囊后w石蠟放置在40~60℃溫箱中,使滅菌后的液體石蠟層由乳白色變成無(wú)色透明。在無(wú)菌條件下,將滅菌除水的液體石蠟用無(wú)菌吸管罐到長(zhǎng)滿菌絲的斜面試管中,液體石蠟要高出斜面頂端1.0厘米左右,然后用無(wú)菌硅膠塞塞好,直立地放在試管架上或罐頭瓶中,置于冰箱或室溫中保藏。液體石蠟灌注過(guò)多,移種時(shí)不方便;過(guò)少則容易干涸。在保藏中,如液體石蠟減少,斜面露出時(shí),應(yīng)及時(shí)以無(wú)菌操作方式補(bǔ)充液體石蠟。
從液蠟保藏中移出菌種時(shí),可不必倒出液蠟,只需用接種鏟從斜面上鏟取一小塊菌絲塊,取出的菌絲塊因沾有液蠟,菌絲生長(zhǎng)勢(shì)弱,需再移轉(zhuǎn)新試管1~2次后,才能恢復(fù)正常生長(zhǎng)。移接時(shí)應(yīng)避免與火焰接觸,以免液蠟燃燒。移接后,原保藏菌種仍可重新封口保藏。
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