什么是UCF·METM UltraNuclease?
UltraNuclease,全能核酸酶,又稱為廣譜核酸酶、非限制性核酸內(nèi)切酶。能夠在多種實(shí)驗(yàn)條件下切割和降解各種形式的DNA和RNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。
Yeasen研發(fā)團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)3年的潛心研究,采用基因工程改造技術(shù),成功在E.coli 表達(dá)系統(tǒng)中獲得UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶,經(jīng)過(guò)純化后的酶具有超高的純度和活性。該酶無(wú)蛋白酶活性、不含內(nèi)毒素和任何病毒污染物,適用于各種應(yīng)用場(chǎng)景,不僅可用于科研,還可以適用于生物制品生產(chǎn)過(guò)程中核酸的去除。
選擇UCF·METM UltraNuclease的6大理由
1、可以降解所有形式的 DNA 和 RNA
2、*的核酸酶活性,樣品中的核酸殘留經(jīng)過(guò)極短時(shí)間處理就能降低到皮克級(jí)別
3、穩(wěn)定性高,耐受性強(qiáng),適應(yīng)多種操作條件
4、無(wú)動(dòng)物源性、無(wú)抗生素
5、GMP 條件生產(chǎn),滿足從研發(fā)到生產(chǎn)的大規(guī)模使用需求
6、符合 ISO9001 質(zhì)量平臺(tái),審計(jì)資料齊全,產(chǎn)品申報(bào)無(wú)憂
UCF·METM UltraNuclease的特性
為了滿足加工和成本要求,我們提供3種純度級(jí)別的全能核酸酶:
1、UCF·METM UltraNuclease (20156):純度≥95%,滿足科研需求
2、UCF·METM UltraNuclease (Endotoxin-free)(20125):純度≥90%,無(wú)內(nèi)毒素,滿足研發(fā)需求
3、UCF·METM UltraNuclease(GMP Grade)(20157):純度≥95%,內(nèi)毒素殘留<0.25EU/1000U符合監(jiān)管要求,適用于生物制品生產(chǎn)
GMP級(jí)別酶的比活 >1.5×106U/mg
無(wú)蛋白酶活性
無(wú)殘留:內(nèi)毒素檢測(cè)、無(wú)菌檢測(cè)、病原體和重金屬檢測(cè)等均符合監(jiān)管要求
宿主蛋白殘留檢測(cè)<10ppm(μg/mL)
耐受性:6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF
Yeasen承諾提供*
Yeasen GMP生產(chǎn)工廠
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶活性檢測(cè)
在標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)條件下檢測(cè)UltraNuclease核酸酶的比活(>1.5×106U/mg)。
圖4 通用底物絕///對(duì)定量法測(cè)試,計(jì)算得到酶的比活*>1.5×106 U/mg
*酶活定義:2625uL的反應(yīng)體系中,在pH 8.0,37℃的條件下30min將超聲后的小牛胸腺DNA消化,使OD A260增加1的酶量為一個(gè)酶活單位U。
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶純度檢測(cè)
SDS-PAGE純度檢測(cè)達(dá)到95%。SEC-HPLC純度檢測(cè)達(dá)到99%。
UCF·METM UltraNuclease質(zhì)檢結(jié)果
表1. 3種不同級(jí)別UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶質(zhì)檢結(jié)果公示
檢測(cè)并合格(√);無(wú)檢測(cè)該指標(biāo)(-)
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶的特性
a、耐受性強(qiáng):
能夠與多種細(xì)胞裂解液同時(shí)使用,如RIPA;與含有多種離子和非離子型去污劑、還原劑的蛋白提取試劑等兼容。
表2. UltraNuclease的耐受量
試劑 | 耐受劑量 | 耐受程度 |
鹽酸胍 | >100 mM | 活性*喪失 |
EDTA | 1 mM | 活性部分喪失 |
5 mM | 活性喪失90% | |
PMSF | 1 mM | 不受影響 |
Triton® X-100 | 濃度<0.4% | 活性喪失30% |
濃度<0.4%<1% | 活性急劇降低 | |
濃度>1% | 活性喪失70% | |
SDS | 濃度在0.1%~1% | 活性急劇降低 |
尿素 | >6 M | 活性急劇降低 |
b、操作簡(jiǎn)易,輕松使用
表3. 推薦使用條件
條件參數(shù) | ///佳條件 | 有效條件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
溫度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巰基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
單價(jià)陽(yáng)離子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根離子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
常見(jiàn)問(wèn)題FAQ
1、UCF·METM UltraNuclease是否與蛋白酶抑制劑兼容?
可以的,正如耐受條件所寫。但是,需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTA。EDTA 開(kāi)始高于1mM時(shí),EDTA將抑制部分核酸酶的活性。
2、為什么你們不同貨號(hào)的核酸酶的體積不是一致的?
由于不同表達(dá)系統(tǒng)的UltraNuclease的活性(U/ml)在生產(chǎn)批次之間可能會(huì)有所不同,因此我們決定指///定每管的單位(比如,酵母表達(dá)的按照每管1KU/μL進(jìn)行分裝;大腸桿菌表達(dá)的按照500U/μL進(jìn)行分裝),即為具體的體積,這樣方便產(chǎn)品的分裝工作。從質(zhì)檢報(bào)告(COA)的酶活力信息可以得到具體的該批次酶活和比活信息。
3、如何擺脫后續(xù)核酸酶干擾?
措施1:采用EDTA螯合金屬離子會(huì)可逆地抑制UltraNuclease活性,極///端條件會(huì)造成不可逆失活,例如100 mM NaOH,70℃處理30 min等;
措施2:對(duì)于帶標(biāo)簽的全能核酸酶可通過(guò)相應(yīng)的標(biāo)簽蛋白純化樹(shù)脂直接去除,去除率>95%;
措施3:對(duì)于不帶標(biāo)簽的全能核酸酶,可通過(guò)陽(yáng)離子交換層析去除,但操作范圍可能較小。下表列舉了適用于去除核酸酶的條件。
表4. 去除核酸酶的陽(yáng)離子交換層析
陽(yáng)離子交換樹(shù)脂 | pH | 樣本和平衡緩沖液 | Nuclease核酸酶 |
SO3- | 6 | 20 mM phosphate / 100 mM NaCl | 結(jié)合 |
SO3- | 6 | 20 mM phosphate / 200 mM NaCl | 不結(jié)合 |
SO3- | 5 | 20 mM acetate / 200 mM NaCl | 結(jié)合 |
SO3- | 5 | 20 mM acetate / 700 mM NaCl | 不結(jié)合 |
SO3- | 4 | 20 mM acetate / 300 mM NaCl | 結(jié)合 |
SO3- | 4 | 20 mM acetate / 800 mM NaCl | 不結(jié)合 |
COO- | 6 | 20 mM phosphate / 0 mM NaCl | 不結(jié)合 |
COO- | 5 | 20 mM acetate / 40 mM NaCl | 結(jié)合 |
COO- | 5 | 20 mM acetate / 100 mM NaCl | 不結(jié)合 |
COO- | 4 | 20 mM acetate / 150 mM NaCl | 部分結(jié)合 |
COO- | 4 | 20 mM acetate/ 400 mM NaCl | 不結(jié)合 |
產(chǎn)品訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
UCF·METM UltraNuclease 全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU |
20156ES50 | 50 KU | |
20156ES60 | 100 KU | |
UCF·METM UltraNuclease(Endotoxin-free)全能核酸酶 | 20125ES25 | 25 KU |
20125ES50 | 50 KU | |
20125ES60 | 100 KU | |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶 | 20157ES25 | 25 KU |
20157ES50 | 50 KU | |
20157ES60 | 100 KU |
HB201229
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。