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UCF·METM UltraNuclease

來(lái)源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2021年02月10日 15:07  
UCF·ME™ UltraNuclease

什么是UCF·METM UltraNuclease?

 

UltraNuclease,全能核酸酶,又稱為廣譜核酸酶、非限制性核酸內(nèi)切酶。能夠在多種實(shí)驗(yàn)條件下切割和降解各種形式的DNA和RNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。

Yeasen研發(fā)團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)3年的潛心研究,采用基因工程改造技術(shù),成功在E.coli 表達(dá)系統(tǒng)中獲得UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶,經(jīng)過(guò)純化后的酶具有超高的純度和活性。該酶無(wú)蛋白酶活性、不含內(nèi)毒素和任何病毒污染物,適用于各種應(yīng)用場(chǎng)景,不僅可用于科研,還可以適用于生物制品生產(chǎn)過(guò)程中核酸的去除

1611885033821351.png 

UCF·METM UltraNuclease的6大理由

 

1、可以降解所有形式的 DNA 和 RNA

2、*的核酸酶活性,樣品中的核酸殘留經(jīng)過(guò)極短時(shí)間處理就能降低到皮克級(jí)別

3、穩(wěn)定性高,耐受性強(qiáng),適應(yīng)多種操作條件

4、無(wú)動(dòng)物源性、無(wú)抗生素

5、GMP 條件生產(chǎn),滿足從研發(fā)到生產(chǎn)的大規(guī)模使用需求

6、符合 ISO9001 質(zhì)量平臺(tái),審計(jì)資料齊全,產(chǎn)品申報(bào)無(wú)憂

 

UCF·METM UltraNuclease的特性

 

為了滿足加工和成本要求,我們提供3種純度級(jí)別的全能核酸酶:

1、UCF·METM UltraNuclease (20156):純度≥95%,滿足科研需求

2、UCF·METM UltraNuclease (Endotoxin-free)(20125):純度≥90%,無(wú)內(nèi)毒素,滿足研發(fā)需求

3、UCF·METM UltraNucleaseGMP Grade(20157):純度≥95%,內(nèi)毒素殘留<0.25EU/1000U符合監(jiān)管要求,適用于生物制品生產(chǎn)

GMP級(jí)別酶的比活 >1.5×106U/mg

 

無(wú)蛋白酶活性

無(wú)殘留:內(nèi)毒素檢測(cè)、無(wú)菌檢測(cè)、病原體和重金屬檢測(cè)等均符合監(jiān)管要求

宿主蛋白殘留檢測(cè)10ppm(μg/mL)

耐受性:6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF

 

Yeasen承諾提供*
  

Yeasen GMP生產(chǎn)工廠

圖片.png

 

UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶活性檢測(cè)

在標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)條件下檢測(cè)UltraNuclease核酸酶的比活(>1.5×106U/mg

 

圖4 通用底物絕///對(duì)定量法測(cè)試,計(jì)算得到酶的比活*>1.5×106 U/mg

*酶活定義:2625uL的反應(yīng)體系中,在pH 8.0,37℃的條件下30min將超聲后的小牛胸腺DNA消化,使OD A260增加1的酶量為一個(gè)酶活單位U。

UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶純度檢測(cè)

SDS-PAGE純度檢測(cè)達(dá)到95%SEC-HPLC純度檢測(cè)達(dá)到99%。

1611885033821351.png
 

UCF·METM UltraNuclease質(zhì)檢結(jié)果

1. 3種不同級(jí)別UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶質(zhì)檢結(jié)果公示

圖片.png
檢測(cè)并合格(√);無(wú)檢測(cè)該指標(biāo)(-)

 

UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶的特性

 

a、耐受性強(qiáng):

能夠與多種細(xì)胞裂解液同時(shí)使用,如RIPA;與含有多種離子和非離子型去污劑、還原劑的蛋白提取試劑等兼容。

2. UltraNuclease的耐受量

試劑

耐受劑量

耐受程度

鹽酸胍

>100 mM

活性*喪失

EDTA

1 mM

活性部分喪失

5 mM

活性喪失90%

PMSF

1 mM

不受影響

Triton® X-100

濃度<0.4%

活性喪失30%

濃度<0.4%<1%

活性急劇降低

濃度>1%

活性喪失70%

SDS

濃度在0.1%~1%

活性急劇降低

尿素

>6 M

活性急劇降低

b、操作簡(jiǎn)易,輕松使用

3. 推薦使用條件

條件參數(shù)

///佳條件

有效條件

Mg2+

1-2 mM

1-10 mM

pH

8-9

6-10

溫度

37℃

0-42℃

DTT

0-100 mM

>0 mM

巰基乙醇

0-100 mM

>0 mM

單價(jià)陽(yáng)離子

0-20 mM

0-150 mM

磷酸根離子

0-10 mM

0-100 mM

 

常見(jiàn)問(wèn)題FAQ
 

1、UCF·METM UltraNuclease是否與蛋白酶抑制劑兼容?

可以的,正如耐受條件所寫。但是,需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTA。EDTA 開(kāi)始高于1mM時(shí),EDTA將抑制部分核酸酶的活性。

2、為什么你們不同貨號(hào)的核酸酶的體積不是一致的?

由于不同表達(dá)系統(tǒng)的UltraNuclease的活性(U/ml)在生產(chǎn)批次之間可能會(huì)有所不同,因此我們決定指///定每管的單位(比如,酵母表達(dá)的按照每管1KU/μL進(jìn)行分裝;大腸桿菌表達(dá)的按照500U/μL進(jìn)行分裝),即為具體的體積,這樣方便產(chǎn)品的分裝工作。從質(zhì)檢報(bào)告(COA)的酶活力信息可以得到具體的該批次酶活和比活信息。

3、如何擺脫后續(xù)核酸酶干擾?

措施1:采用EDTA螯合金屬離子會(huì)可逆地抑制UltraNuclease活性,極///端條件會(huì)造成不可逆失活,例如100 mM NaOH,70℃處理30 min等;

措施2:對(duì)于帶標(biāo)簽的全能核酸酶可通過(guò)相應(yīng)的標(biāo)簽蛋白純化樹(shù)脂直接去除,去除率>95%;

措施3:對(duì)于不帶標(biāo)簽的全能核酸酶,可通過(guò)陽(yáng)離子交換層析去除,但操作范圍可能較小。下表列舉了適用于去除核酸酶的條件。

4. 去除核酸酶的陽(yáng)離子交換層析

陽(yáng)離子交換樹(shù)脂

pH

樣本和平衡緩沖液

Nuclease核酸酶

SO3-

6

20 mM phosphate / 100 mM NaCl

結(jié)合

SO3-

6

20 mM phosphate / 200 mM NaCl

不結(jié)合

SO3-

5

20 mM acetate / 200 mM NaCl

結(jié)合

SO3-

5

20 mM acetate / 700 mM NaCl

不結(jié)合

SO3-

4

20 mM acetate / 300 mM NaCl

結(jié)合

SO3-

4

20 mM acetate / 800 mM NaCl

不結(jié)合

COO-

6

20 mM phosphate / 0 mM NaCl

不結(jié)合

COO-

5

20 mM acetate / 40 mM NaCl

結(jié)合

COO-

5

20 mM acetate / 100 mM NaCl

不結(jié)合

COO-

4

20 mM acetate / 150 mM NaCl

部分結(jié)合

COO-

4

20 mM acetate/ 400 mM NaCl

不結(jié)合


產(chǎn)品訂購(gòu)信息
 

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

UCF·METM UltraNuclease 全能核酸酶

20156ES25

25 KU

20156ES50

50 KU

20156ES60

100 KU

UCF·METM UltraNuclease(Endotoxin-free)全能核酸酶

20125ES25

25 KU

20125ES50

50 KU

20125ES60

100 KU

UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶

20157ES25

25 KU

20157ES50

50 KU

20157ES60

100 KU

 

 
HB201229

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