NOD樣受體1elisa試劑盒的性能和操作流程

來源：上海一研生物科技有限公司 2021年02月18日 22:26

　　NOD樣受體1elisa試劑盒的性能：

　　準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值。

　　靈敏度：檢測濃度小于0.1pg/mL。

　　特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

　　重復性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。

　　貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

　　NOD樣受體1elisa試劑盒的操作流程如下：

　　（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

　?。?）酶標板置4℃，包被過夜。

　?。?）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，產(chǎn)品僅用于科研用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

　?。?）陰性對照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

　?。?）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

　?。?）洗板。

　　（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。

　?。?）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

　?。?）洗板。

　　（10）每孔加TMB顯色液100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

　　（11）每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應。

　　（12）分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，測得的OD值為兩者之差，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

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