磺胺二甲嘧啶檢測(cè)試劑盒樣本前處理步驟:
注:樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí),都必須注意:
(a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
(b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。樣本前處理需配制:
配液1:衍生化試劑15.1mg2-硝基苯j(luò)ia醛
加甲醇10ml溶解(濃度為10mM)。
配液2:用去離子水將2×濃縮復(fù)溶液按1:1稀釋(1份濃縮復(fù)溶液+1份去離子水)用于抗體稀釋和樣本的復(fù)溶。
配液3:0.1MK2HPO422.8gK2HPO4?3H2O
加去離子水溶解定容至1L。
配液4:1MHCl8.3ml濃HCl
用去離子水定容至100ml。
配液5:1MNaOH4gNaOH
用去離子水溶解定容至100ml。
(a)水產(chǎn)樣本前處理
┅┅用均質(zhì)器均質(zhì)樣本;
┅┅取1±0.05g的均質(zhì)物(魚/蝦),分別加入4ml的蒸餾水,0.5ml1MHCL和100ml衍生化試劑,充分振蕩;
┅┅在37oC過夜孵育(大約16h);
┅┅分別加入5ml0.1MK2HPO4,0.4ml1MNaOH和5ml乙酸乙酯,劇烈振蕩30s;
┅┅在室溫下(20-25oC/68-77℉)3000g以上離心10min;
┅┅取出2.5ml乙酸乙酯到另一個(gè)容器中50oC下氮?dú)獯蹈苫蛐D(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干;
┅┅用1ml正己烷(或正庚烷)溶解干燥物,用1ml已稀釋好的復(fù)溶液充分混合;
┅┅在室溫下(20-25oC/68-77℉)3000g以上離心10min;
┅┅取50ml下層液體用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):2
注:樣本應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光處并且需要冷藏保存。
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