ELISA試劑盒ABS法
ABS為親和素生物素系統(tǒng)的略語。親和素是一種糖蛋白,分子量60 000,每個分子由4個能和生物素結(jié)合的亞基組成。生物素為小分子化合物,分子量244。用化學(xué)方法制成的衍生物生物糶-羥基琥珀酖亞胺醏可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分子形成生物索標(biāo)記產(chǎn)物,標(biāo)記方法頗為簡便。生物素與親和素的結(jié)合具有很強(qiáng)的特異性,其親和力較抗原抗體反應(yīng)大得多,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于一個親和素可與4個生物素分子結(jié)合,因此如把ABS與ELISA試劑盒偶聯(lián)起來,就可再提髙ELISA試劑盒的靈敏度。
ABS- ELISA法可分為酶標(biāo)記親和素-生物素(LAB)法和橋聯(lián)親和梟-生物素(LAS〉法兩種類型。兩者均以生物素標(biāo)記的抗體(或抗原)代替原ELISA系統(tǒng)中的酶標(biāo)抗體(或抗原、在ELISA中,固相生物素先與不標(biāo)記的親和素反應(yīng),然后再加海標(biāo)記的生物素以進(jìn)一步提高敏感度。在早期,親和素從蛋清中提取,這種卵親和素為域性糖蛋白,與聚苯乙烯載體的吸附性很強(qiáng),用于ELISA中可使本底增髙。從鏈靄菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點(diǎn),在ELISA試劑盒應(yīng)用中有替代前者的趨勢。
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