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單細(xì)胞培養(yǎng)有哪些注意要點(diǎn)?

來源:Bio-Techne   2021年03月22日 15:14  
  單細(xì)胞培養(yǎng)從植物器官、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)物中游離出單個細(xì)胞,在無菌條件下,進(jìn)行體外生長、發(fā)育的技術(shù),人們分離和培養(yǎng)植物單細(xì)胞的設(shè)想和實(shí)踐都比較早,但成功地進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng)是隨著更有效的培養(yǎng)基的發(fā)展以及從愈傷組織懸浮培養(yǎng)物分離單細(xì)胞的專門技術(shù)的建立才實(shí)現(xiàn)的。
  細(xì)胞間實(shí)現(xiàn)信號傳遞交流,采用三明治方式將PET/PC膜嵌在兩板之間,除了細(xì)胞本身,培養(yǎng)基中其他成分都可以自由通過PET/PC膜,達(dá)到細(xì)胞間信號傳遞交流的目的,配合10cm培養(yǎng)皿使用,適用于任何不同類型細(xì)胞間的共培養(yǎng),培養(yǎng)皿底部的飼養(yǎng)層細(xì)胞可以為目的單細(xì)胞提供細(xì)胞生長因子,促進(jìn)其生長增殖。
  細(xì)胞培養(yǎng)是采用無菌操作的方法,模擬動物體內(nèi)的生理條件,在體外進(jìn)行培養(yǎng).使其不斷地生長、繁殖,從而觀察細(xì)胞的增殖、分化以及細(xì)胞衰老等過程的生命現(xiàn)象。常見的細(xì)胞培養(yǎng)方式可分為貼壁和懸浮兩種。細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)操作包括:1)細(xì)胞的接種和傳代;2)細(xì)胞計數(shù);3)細(xì)胞的復(fù)蘇和凍存。
  單細(xì)胞培養(yǎng)相對常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)有哪些注意要點(diǎn)?
  1) 細(xì)胞的取材來源:取材應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等,一般來講,胚胎組織較成熟個體組織容易培養(yǎng),分化低的較分化高的組織容易生長,腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng)。
  2) 取材應(yīng)嚴(yán)格無菌:確保所取材料及器皿手術(shù)器材無菌并在無菌條件下操作。
  3) 防止鄰近組織細(xì)胞的污染:分離時要仔細(xì)去除所取材料上的血液、脂肪、壞死組織及結(jié)締組織,可根據(jù)客戶要求進(jìn)行細(xì)胞的免疫化學(xué)檢測。
  4) 狀態(tài)難以調(diào)整:受到取材困難等因素的影響,獲得的細(xì)胞量少,細(xì)胞狀態(tài)不佳造成的細(xì)胞增殖緩慢往往造成實(shí)驗室人員長時間進(jìn)行細(xì)胞狀態(tài)調(diào)整,無法獲得足量的細(xì)胞進(jìn)行后城檢測實(shí)。

       Namocell單細(xì)胞分離儀可以為用戶提供高效的單細(xì)胞培養(yǎng)方案,采用一次性微流控分離芯片,可以保證用戶的細(xì)胞樣本之間不會存在交叉污染;體系內(nèi)部的鞘液壓力極低,不到2psi,分離過程對細(xì)胞無損傷,能保持細(xì)胞活性;能夠快速分選單細(xì)胞至各類收集孔板中,一塊96孔板最快在1min左右,大大縮短了細(xì)胞在分選過程中的時間。

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