顯微注射是在高倍倒置顯微鏡下,利用顯微操作器,控制顯微注射針在顯微鏡視野內(nèi)移動(dòng)的機(jī)械裝置,用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞或早期胚胎操作的一種方法。
動(dòng)物顯微注射步驟:
1、注射針內(nèi)裝液:使用無(wú)菌的微量加樣器從微注射針的后部加入待注射樣品酚紅一滴。
2、注射針安裝和定位:
(1) 將裝液后的針頭的游離端安在連接器上,然后旋緊連接器以固定針頭,再將其固定到微操作儀的托針管上;
(2) 把載有待注射樣本的培養(yǎng)皿放在顯微鏡載物臺(tái)上,用低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)細(xì)胞調(diào)焦;
(3)移動(dòng)針頭并在顯微鏡下調(diào)整微操作儀,直到針頭的陰影在視野的中心上方;
(4)使用工作用放大倍數(shù),調(diào)準(zhǔn)細(xì)胞焦距,找到針尖。
3、顯微注射:
(1)使針尖對(duì)準(zhǔn)細(xì)胞的待注射部位(細(xì)胞與針尖在同一焦面上),旋轉(zhuǎn)推進(jìn)旋鈕,針刺入細(xì)胞內(nèi)(卵膜、細(xì)胞膜、核膜);
(2)旋轉(zhuǎn)加樣旋鈕,將樣本加入,并離開細(xì)胞。
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