瓊脂糖凝膠電泳操作步驟

來源：廣州瑞豐實驗設(shè)備有限公司 2021年07月05日 09:47

那么下面為大家簡單介紹一下關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟：

一. 為了制備凝膠，將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合至所需濃度，并在微波爐中加熱使其熔化。

瓊脂糖凝膠濃度

1. 所用瓊脂糖的百分比取決于要分離的片段的大小。

2. 瓊脂糖的濃度是指瓊脂糖相對于緩沖液體積的百分比（w / v），瓊脂糖凝膠通常在0.2％至3％的范圍內(nèi)。

3. 瓊脂糖濃度越低，DNA片段遷移越快。

4. 通常，如果目的是分離大的DNA片段，則應(yīng)使用低濃度的瓊脂糖，如果目的是分離小的DNA片段，則建議使用高濃度的瓊脂糖。

二. 將溴化乙錠添加到凝膠中（**終濃度為0.5 ug / ml），以促進(jìn)電泳后DNA的可視化。

三. 將溶液冷卻至約60°C后，將其倒入裝有樣品梳子的澆鑄盤中，使其在室溫下固化。

四. 凝膠固化后，將梳子移開，注意不要撕裂孔的底部。

五. 仍在塑料托盤中的凝膠水平插入電泳儀并用緩沖液覆蓋。

六. 然后將含有DNA與上樣緩沖液混合的樣品吸移到樣品孔中，將蓋子和電源線放在設(shè)備上，并施加電流。

七. 可以通過觀察電極上的氣泡確認(rèn)電流。

八. 鑒于其負(fù)電荷，DNA將遷移至通常為紅色的正電極。

九. DNA遷移到凝膠中的距離可以通過肉眼監(jiān)測跟蹤染料（如溴酚藍(lán)和二甲苯氰染料）的遷移來判斷。

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