流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry , FCM):是一種定量分析技術(shù),是指利用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞特異性標(biāo)記熒光信號(hào)而測定細(xì)胞的多種生物物理性質(zhì)的方法,同時(shí)也是一項(xiàng)可以把具有某相同熒光信號(hào)特性的某些細(xì)胞亞群從多細(xì)胞群體中分離和富集出來的細(xì)胞分析技術(shù)。
流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用廣泛,一般可作以下用途:
流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用廣泛,一般可作以下用途:
第一、流式細(xì)胞術(shù)可以用來檢測細(xì)胞表面以及胞內(nèi)的各種標(biāo)志,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分群鑒定以及各種蛋白表達(dá)量高低的比較。比如CD3是T細(xì)胞的標(biāo)志、CD19是B細(xì)胞的標(biāo)志、EpCAM是上皮細(xì)胞的標(biāo)志等。不僅僅是免疫細(xì)胞,其他的如腫瘤細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、干細(xì)胞等都可以用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測。實(shí)體組織只要經(jīng)過處理后制成單細(xì)胞懸液也能用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行分析和分選。
第二、通過標(biāo)記Ki67、BCL-2、caspases等增殖及凋亡相關(guān)基因,流式細(xì)胞術(shù)可用來檢測細(xì)胞的增殖以及凋亡。此外還有CFSE、以及PI-annexin V等染料,可用來進(jìn)行增殖和凋亡分析,在藥物對(duì)腫瘤影響的研究過程中應(yīng)用廣泛。
第三、流式細(xì)胞術(shù)可用來分析細(xì)胞周期。細(xì)胞核DNA含量隨著細(xì)胞增殖周期時(shí)相的不同而發(fā)生變化,用DNA染料進(jìn)行染色,DNA含量多,熒光信號(hào)強(qiáng),DNA含量少,熒光強(qiáng)度低。通過對(duì)細(xì)胞瞬間的快速測定,判斷細(xì)胞所處的細(xì)胞周期時(shí)相,并分析群體細(xì)胞中處于不同周期時(shí)相的細(xì)胞比例,以研究細(xì)胞的周期,DNA復(fù)制和染色體倍性等。在腫瘤學(xué)研究中尤其常用,可以此來判斷藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞影響、腫瘤的生長速度與患者預(yù)后等。
第四、流式細(xì)胞術(shù)可用于疾病診斷中病原微生物的檢測,以及環(huán)境中飲用水、湖泊、河流、原油中的微生物和海洋微生物檢測等。
第五、流式細(xì)胞術(shù)還可用于農(nóng)林畜牧養(yǎng)殖業(yè),如依據(jù)DNA含量,用于玉米、向日葵、葡萄等的倍性鑒定,分選X、Y精子以控制家畜性別。
除了以上常用的幾個(gè)方面,還有很多其他的用法。實(shí)驗(yàn)猿們繼續(xù)探索吧
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