白細(xì)胞介素6試劑盒背景介紹:
白細(xì)胞介素 6 (IL-6)是一種同時(shí)具備促炎性和抗炎性的細(xì)胞因子。在人類中,它由 IL-6 基因編碼。在感染期間和受到外傷后,尤其是燒傷或其它組織損傷導(dǎo)致的炎癥,IL-6 會(huì)由 T 細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌,促進(jìn)免疫應(yīng)答。研究表明,小鼠抵抗肺炎鏈球菌感染時(shí)需要 IL-6 的參與,說明 IL-6 在抵抗感染中發(fā)揮作用。IL-6 在很多疾病如糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化、抑郁癥、阿爾茨海默氏病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性骨髓瘤、前列腺癌、白塞氏病和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等中可促進(jìn)炎性和自身免疫疾病進(jìn)程。晚期/轉(zhuǎn)移性癌癥患者的血液中具有較高水平的 IL-6。
白細(xì)胞介素6試劑盒檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人 IL-6 抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的 IL-6 與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中 IL-6 的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在 450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng) 570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
白細(xì)胞介素6試劑盒樣本采集與貯存
細(xì)胞培養(yǎng)上清300 × g 離心 10 分鐘去除沉淀物,即刻檢測(cè),或者分裝,-20℃以下貯存。
血清樣本離心管收集血清。血樣凝集 30 分鐘后,1,000 × g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測(cè),或者分裝,-20℃以下貯存。
血漿樣本EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。1,000 × g 離心 30 分鐘收集樣本。即刻檢測(cè),或者分裝,-20℃以下貯存。本試劑盒可能適用于其它生物學(xué)樣本。細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清和血漿已經(jīng)過驗(yàn)證。
注意:檢測(cè)前,樣本中可見的沉淀必須去除。不要使用嚴(yán)重溶血或高血脂的樣本。樣本應(yīng)分裝并貯存于-20℃,以避免人IL-6 活性的丟失。如果在 24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。樣本可以存放在 2 - 8℃。避免樣本的反復(fù)凍融。在檢測(cè)前,冷凍樣本應(yīng)緩慢地恢復(fù)至室溫,輕柔地混勻。
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