色譜柱是高效液相色譜儀的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透粉性,延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。因此對(duì)高效液相色譜儀色譜柱的維護(hù)是關(guān)鍵。
高效液相色譜儀色譜柱是消耗品,因此盡可能地仔細(xì)使用會(huì)延長(zhǎng)色譜柱的壽命。
1、色譜柱使用前注意事項(xiàng)
色譜柱的儲(chǔ)存液無(wú)特殊說(shuō)明均為評(píng)價(jià)報(bào)告所示的流動(dòng)相。在使用前一定要注意色譜柱的儲(chǔ)存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。如胺基(NH2)氰基(CN)柱均為正相條件下評(píng)價(jià),所以如果使用條件為反相條件時(shí),請(qǐng)用一中介流動(dòng)相(如異丙醇)。
先置換掉柱內(nèi)的儲(chǔ)存液,然后再應(yīng)用反相條件對(duì)于C18固定相采用的是甲醇-水為評(píng)價(jià)流動(dòng)相,若要使用含鹽濃度較高的流動(dòng)相,使用前請(qǐng)用超純水或甲醇含量相對(duì)較低的甲醇-水頂替掉原來(lái)的評(píng)價(jià)流動(dòng)相,否則會(huì)對(duì)色譜柱造成極大的傷害,將會(huì)明顯地減少色譜柱使用壽命。
2、色譜的使用方向
高效液相色譜儀色譜柱標(biāo)簽上的箭頭所示方向是評(píng)價(jià)時(shí)流動(dòng)相流動(dòng)的方向,使用過程相流動(dòng)的方向也按此方向。
3、流動(dòng)相
流動(dòng)相中所用的各種有機(jī)溶劑要盡可能地使用色譜,或至是分析純?cè)噭┡淞鲃?dòng)相水Z好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過0.45或0.22m的濾膜過濾一次則更好,這一點(diǎn)對(duì)含鹽的流動(dòng)相尤為重要。另外裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。總之,必須保證所使用的流動(dòng)相和色譜系統(tǒng)是足夠的清潔。
4、樣品
樣品也要盡可能的清潔,同樣可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理(SPE柱)對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理;若樣品不便處理,要使用保護(hù)柱。在用正相色譜法分析樣品時(shí),如無(wú)特殊要求,所有的溶劑和樣品應(yīng)嚴(yán)格脫水。
5、PH值
以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料高效液相色譜柱通常的PH值適用范圍是2.0-10.0。當(dāng)必須要在PH值適用范圍的邊界(特別是在8.0≤PH≤10.0時(shí))條件下使用高效液相色譜柱時(shí),每次使用結(jié)束后立即用適合于高效液相色譜儀色譜柱儲(chǔ)存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗,并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。
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