摘要 ：本應(yīng)用簡報(bào)介紹了對乙醇和異丙醇類手部消毒液的分析。使用 Agilent J&W DB-WAX 色譜柱優(yōu)化色譜分離度和峰形。采用火焰離子化檢測器 (FID) 進(jìn)行檢測。根據(jù)美國藥 典 (USP) <611> 方法的建議，使用內(nèi)標(biāo) (IS) 進(jìn)行定量。從峰拖尾因子、乙醇與內(nèi)標(biāo) 的分離度和定量重現(xiàn)性幾個(gè)方面考察了儀器的適用性。

前言：乙醇和異丙醇 (IPA) 是手部消毒液中的主 要活性成分。為了保持有效性，乙醇或異 丙醇 (IPA) 的濃度應(yīng)保持在適當(dāng)范圍內(nèi)， 通常為手部消毒液包裝上所標(biāo)示的濃度， 即 65%–75%。由于手部消毒液產(chǎn)品中可 能存在其他醇類雜質(zhì)或一些用于生產(chǎn)產(chǎn)品的不當(dāng)添加物，因此測定所需醇類處 于適當(dāng)濃度范圍內(nèi)非常重要。氣相色譜 (GC) 是 USP 建議的用于測定乙醇濃度的 技術(shù)之一。GC 還可以提供用于鑒定醇類 型的保留時(shí)間信息，確保手部消毒液不含 污染物。憑借其定性和定量分析功能，氣 相色譜將繼續(xù)在手部消毒液的質(zhì)量控制中 發(fā)揮關(guān)鍵作用。 乙醇測定方法（例如 USP <611>[1] 和 ASTM D3695[2]）推薦使用中等極性或極性色 譜柱，以實(shí)現(xiàn)醇類組分的良好分離和響 應(yīng)。根據(jù)我們之前的研究[3]，Agilent J&W DB-Wax 或 Agilent DB-624 超高惰性色譜 柱可為醇類分析提供更尖銳、更對稱的峰 形。建議使用 FID 進(jìn)行醇類檢測，因?yàn)樗?易于使用，并且在樣品前處理過程中將醇 類稀釋后，仍可以在檢測濃度范圍內(nèi)產(chǎn)生 穩(wěn)定且足夠高的響應(yīng)。本研究在配備 FID 的 Agilent 8860 GC 上使用 DB-WAX 超高惰性色譜柱進(jìn)行醇類分析。評估了保留時(shí) 間重現(xiàn)性、峰分離度、峰拖尾因子和定 量精度等系統(tǒng)性能。目的在于證明 8860 GC/FID 系統(tǒng)配合安捷倫超高惰性色譜柱 對于手部消毒液醇類分析的適用性。

實(shí)驗(yàn)部分 Agilent 8860 GC 配備了分流/不分流進(jìn)樣 口和 FID 檢測器。采用配備 5 μL 進(jìn)樣針 的 Agilent 7693A 自動(dòng)液體進(jìn)樣器 (ALS) 進(jìn)行液體進(jìn)樣。分析參數(shù)見表 1。 試劑與標(biāo)準(zhǔn)品 醇類溶劑和乙腈 (IS) 均購自上海安譜科學(xué) 儀器有限公司。稱取 58.4 mg（約 50 µL） 甘油并用蒸餾水稀釋至 1 mL，制得甘油 工作溶液。甘油工作溶液的體積濃度經(jīng) 計(jì)算為 4.6% (v/v)。將醇類純樣品或其 工作溶液加入蒸餾水中，使最終體積為1 mL，從而制得醇類校準(zhǔn)標(biāo)樣。乙醇、 IPA 和甘油歸為第 1 組校準(zhǔn)溶液。乙醇和 IPA 的校準(zhǔn)范圍為 1%–4% (v/v)。甘油的 濃度范圍為 0.01%–0.18% (v/v)。制得的 甲醇和正丙醇 (n-PA) 歸為第 2 組校準(zhǔn)溶 液。甲醇的校準(zhǔn)范圍為 1%–4% (v/v)，正 丙醇為 0.1%–1.5% (v/v)。將內(nèi)標(biāo) (IS) 乙 腈 (ACN) 以 5% (v/v) 的濃度加入校準(zhǔn)溶 液中。制得的校準(zhǔn)溶液如表 2 所示。用 蒸餾水將 25 µL 乙醇、25 µL IPA 和 50 µL 乙腈稀釋至 1 mL，制得 QC 樣品。 由于手部消毒液凝膠樣品黏度過高，無法 直接進(jìn)行液體進(jìn)樣，在使用 7693A 自動(dòng)液 體進(jìn)樣器進(jìn)樣前必須稀釋。因此實(shí)際樣品 和校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)液均采用溶劑稀釋制得。使用 1 mL 氣密進(jìn)樣針將 50 µL 手部消毒液樣品 加入燒瓶中。然后加入 50 µL 乙腈作為內(nèi) 標(biāo)，用蒸餾水將樣品稀釋至 1 mL，用于 后續(xù)分析。

結(jié)果與討論：本應(yīng)用簡報(bào)重點(diǎn)分析手部消毒液中的主 要醇類成分和可能的甲醇污染。校準(zhǔn)標(biāo) 樣中包括 5 種醇類，分別為甲醇、乙醇、 IPA、正丙醇和甘油。其中，乙醇、IPA 和正丙醇的濃度通常會(huì)有標(biāo)識，因?yàn)樗鼈?與滅病毒效果密切相關(guān)。在實(shí)際樣品中還 可以檢測到甘油和其他醇類，但生產(chǎn)商沒 有特別標(biāo)出這些醇類的濃度。校準(zhǔn)標(biāo)樣中 包含甘油的目的是證明所述系統(tǒng)可產(chǎn)生合 適的峰形并足以檢測出甘油等后洗脫的高 粘度醇類。 在 DB-WAX 超高惰性色譜柱上分離 5 種 醇類和 1 種內(nèi)標(biāo)的水性溶液，組分濃度范 圍為 1.0%–4% (v/v)。此樣品為第 1 組和 第 2 組的中等濃度校準(zhǔn)標(biāo)樣與甘油工作 標(biāo)樣的混合物。如色譜圖（圖 1）和表 3 所示，所有峰的拖尾因子均小于 1.2。甲 醇和 IPA 在乙醇之前洗脫。正丙醇與乙腈 (IS) 之間的分離度為 9，乙醇與乙腈 為 12。USP <611> 標(biāo)準(zhǔn)要求醇類的峰拖尾 因子小于 2.0，與內(nèi)標(biāo)之間的峰分離度大 于 4.0。8860 GC 的流路從分流/不分流進(jìn) 樣口開始，經(jīng)過分析柱，最后在 FID 處結(jié) 束，此流路上實(shí)現(xiàn)的分離度和峰形證明該 系統(tǒng)適用于目標(biāo)醇類的分析。乙醇和 IPA 的分離度為 1.31。雖然并未實(shí) 現(xiàn)基線分離，但由于大多數(shù)情況下乙醇 和 IPA 不會(huì)同時(shí)存在于同一種手部消毒液 中，因此通常不會(huì)影響定量準(zhǔn)確性。即使 兩者同時(shí)存在，1.31 的分離度也足以對主 要醇類進(jìn)行準(zhǔn)確定量，如下面的手部消毒 液凝膠樣品分析結(jié)果所示。