活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

主要用途

  活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）檢測試劑是一種旨在通過腦磷脂和鞣花酸反應(yīng)物，與血漿樣品混合后，加入鈣離子啟動(dòng)凝血反應(yīng)，產(chǎn)生凝塊，通過目測或凝血儀檢測，來測定樣品中凝塊形成時(shí)間的*而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物和人體血漿樣品凝血系統(tǒng)的檢測，以及凝血因子和抑制劑的的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。

技術(shù)背景

活化部分凝血活酶時(shí)間（activated partial thromboplastin time；APTT），又稱為白陶土腦磷脂凝血時(shí)間（kaolin cephalin clotting time；KCCT），是指血漿在腦磷脂（缺乏組織因子的部分凝血活酶）、接觸因子激活劑和鈣離子等的參與下，形成纖維蛋白凝塊（fibrin clot）所需的時(shí)間長度。其反映和檢測血液系統(tǒng)內(nèi)源性（intrinsic）又稱為接觸性激活通路（contact activation pathway）和常見（common）凝血通路或機(jī)制的生理或病理狀況。內(nèi)源性凝血通路或機(jī)制由凝血因子 8、9、11、12、前激肽釋放酶（prekallikrein）、高分子激肽原（high molecular weight kininogen；HMWK）等構(gòu)成；而常見通路由凝血因子1、2、5、10等組成。正常活化部分凝血活酶時(shí)間通常為25至40秒。活化部分凝血活酶時(shí)間用于篩選出血傾向的病人，即內(nèi)源性凝血系統(tǒng)異常的病人；定量檢測凝血因子2、5、8、9、10、11、12等差異和缺陷；檢測血液病理性凝血抑制劑，例如狼瘡抗凝物（lupus anticoagulant；LA）；監(jiān)測肝素抗凝血療法和凝血因子替代療法。維生素K缺乏、彌散性血管內(nèi)凝血（disseminated intravascular coagulation；DIC）、血管性血友?。?/span>Von Willebrand disease）、血友病（haemophilia）、遺傳性無纖維蛋白原血癥（congenital afibrinogenemia）、凝血因子缺陷、肝素、狼瘡抗凝物等導(dǎo)致活化部分凝血活酶時(shí)間延長；而血栓性疾病則引起活化部分凝血活酶時(shí)間縮短。其檢測方法在于使用血小板不足的血漿，血小板替代物磷脂（來自于兔腦、牛腦、大豆或腦磷脂等），接觸因子激活劑包括白陶土（kaolin）、硅藻土（celite）、二氧化硅微粒（micronized silica），或鞣花酸（ellagic acid）等，混合在一起，加入鈣離子后啟動(dòng)凝血反應(yīng)。

產(chǎn)品內(nèi)容

  抗凝液（Reagent A）        毫升

  反應(yīng)液（Reagent B）          毫升

  催化液（Reagent C）          毫升

  標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）          微升（另購）

產(chǎn)品說明書              1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；有效保證3月；  反應(yīng)液（Reagent B）一旦啟用，有效保證1周

用戶自備

2毫升離心管：用于樣品操作的容器

1.5毫升離心管：用于樣品反應(yīng)的容器

微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作

培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應(yīng)物孵育

計(jì)時(shí)器：用于反應(yīng)計(jì)時(shí)

比色皿：用于樣品凝血儀測定的容器

凝血儀：用于樣品凝塊形成分析

實(shí)驗(yàn)步驟

一、 血漿制備

1． 準(zhǔn)備好2毫升離心管

2． 加入xx微升  抗凝液（Reagent A） 

3． 抽取1.8毫升血液到含  抗凝液（Reagent A）的離心管

4． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為3000g 

5． 小心移取上層黃色液體到新的2毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）

6． 即刻置于冰槽里備用（注意：2小時(shí)內(nèi)使用）

二、 測定準(zhǔn)備

1． 準(zhǔn)備好上述制備的血漿樣品

2． 設(shè)定好凝血儀并預(yù)熱

3．   催化液（Reagent C）置于37℃恒溫水槽均衡溫度

三、 凝血測定（手工操作）

1． 準(zhǔn)備好1個(gè)1.5毫升離心管

2． 移取xx微升  反應(yīng)液（Reagent B）

3． 放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱里孵育1分鐘

4． 加入100微升上述制備的待測樣品，混勻

5． 放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘（注意：不宜超過5分鐘）

6． 即刻加入xx微升  催化液（Reagent C）；同時(shí)開啟計(jì)時(shí)器進(jìn)行計(jì)時(shí)（注意：以秒計(jì)時(shí)）

7． 傾斜離心管觀察凝塊形成，直至液體凝固；同時(shí)關(guān)閉計(jì)時(shí)器結(jié)束計(jì)時(shí)

8． 正常參考范圍：

手工操作：25至35秒

凝血儀操作：23至31秒

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品為20次操作，包括標(biāo)準(zhǔn)對照測定

2． 本產(chǎn)品檢測敏感度達(dá)0.01國際單位Factor VIII含量

3． 操作時(shí)，須戴手套

4． 血液采集，避免使用肝素、EDTA、草酸抗凝管

5． 樣品避免溶血，采血避免損傷組織

6． 血漿中血小板含量大于10000/毫升，以及含有雌激素、苯妥英、沃法令、納洛酮、肝素等則干擾檢測

7． 血漿樣品避免反復(fù)凍融：4℃環(huán)境維持4小時(shí)；－20℃維持2月；－80℃維持6月

8．   標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent D）為標(biāo)準(zhǔn)對照血漿

9． 建議用戶建立自己的正常參考值范圍

10． 用戶可以使用各種自動(dòng)和半自動(dòng)凝血儀：例如Electra 600等進(jìn)行檢測，按照儀器操作手冊操作

11． 本公司提供系列血液凝集檢測試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感