大容量低速冷凍離心機的實際運用分享

來源：山東百歐醫(yī)療科技有限公司 2021年09月15日 15:09

　　大容量低速冷凍離心機結構簡單、安裝方便、操作容易，能保持產(chǎn)品的晶粒形狀，采用彈性支撐結構，能減少由于不均勻負載引起的振動，其運轉平穩(wěn)。能實現(xiàn)密封，避免對物料的污染。

　　下面咱們來了解下采用大容量低速冷凍離心機提染色體DNA，可直接應用于常規(guī)的分子生物學實驗，包括PCR、限制性內(nèi)切酶的切割，以及基因組文庫的構建的實際應用：

　　1、取1ml過夜培養(yǎng)菌液于8000g，離心機離心2min。去除培養(yǎng)基后，用400ulSTE緩沖液（100mMNaCl，10mMTris/HCl，1mMEDTA，pH8.0）重懸菌體，按相同條件離心清洗菌體兩次。

　　2、收集的菌體用200ulTE緩沖液（10mMTris/HCl，1mMEDTA，pH8.0）懸起后加約50mg直徑425-600um規(guī)格的玻璃珠，再加入100ulTirs飽和苯酚。

　　3、上述混合液在漩渦振蕩器上振蕩（細菌，振蕩60s；酵母，振蕩120s-200s），隨后于4℃，13000g，離心5min。

　　4、吸取上層水相（約160ul）轉移至一個新的離心管中，加TE緩沖液補至200ul，再加入100ul氯仿混勻后，于4℃，13000g，離心5min。重復此步兩到三次。

　　5、轉移上層水相（約160ul）至一個新的離心管中，補加40ulTE和5ulRNase（10mg/ml），37℃消化10min。

　　6、加入100ul氯仿混勻于4℃，13000g，離心5min。

　　7、轉移上層水相（約150ul）至一個新的離心管中。

　　8、至此，上層水相即含有純化好的基因組DNA，可直接用于隨后的常規(guī)分子生物學實驗。

　　希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。

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