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駝類HCAb由兩個單可變結(jié)構(gòu)域重鏈組成，其大小比傳統(tǒng)抗體小得多。重要的是，可以分離HcAbs的單可變結(jié)構(gòu)域（VHH），并保持與完整HcAbs觀察到的結(jié)合特性。產(chǎn)生的VHH抗體被命名為“納米抗體”，因為其分子量約為15 kDa。

傳統(tǒng)抗體、重鏈抗體和納米抗體的示意圖比較。VH=重鏈可變域，VL=輕鏈可變域，VHH=單可變域重鏈。IgG抗體的大小約為150 kDa，HcAb為50 kDa，相應(yīng)的納米體為15 kDa。

納米抗體的生產(chǎn)

通過用感興趣的抗原免疫動物（在本例中為駱駝或羊駝），產(chǎn)生靶向特異性納米抗體開始類似于傳統(tǒng)抗體生產(chǎn)。然后從動物的簡單血液中提取含有感興趣的HCAb的免疫細(xì)胞。由于VHH的cDNA具有良好的特征，因此可以分離這些細(xì)胞的mRNA并進(jìn)行PCR擴(kuò)增，以生成僅用于VHH的序列。然后可以通過噬菌體展示克隆和篩選這些基因，并將結(jié)果轉(zhuǎn)移到細(xì)菌或哺乳動物表達(dá)載體上進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。一旦這些命中的DNA序列被識別和克隆，產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)就可以進(jìn)行進(jìn)一步的操作，例如添加親和標(biāo)簽或細(xì)胞靶向序列。給定納米抗體的cDNA的可用性也消除了多克隆抗體可能產(chǎn)生的批次間變異的障礙或擔(dān)憂。

納米抗體的應(yīng)用

納米抗體在細(xì)胞和體內(nèi)成像領(lǐng)域具有明顯優(yōu)勢。它們的尺寸使它們成為超分辨率顯微鏡（super-res）的理想工具。根據(jù)方法學(xué)的不同，細(xì)胞中的單個蛋白質(zhì)顆粒通常可以通過super-res定位到20-50nm。

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