ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做欠好的原因分析，剛剛觸摸Elisa實(shí)驗(yàn)，研討雞透明質(zhì)酸（HA）相關(guān)目標(biāo)的實(shí)驗(yàn)，做完雞透明質(zhì)酸（HA）實(shí)驗(yàn)后反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的梯度都欠好。剛加完顯色劑的時(shí)分梯度還算明顯，但是顯色比較淺，跟著時(shí)刻延伸(大約6、7分鐘)往后梯度就不明顯了。停止反應(yīng)后測(cè)得的值梯度就沒有了。

為此，我公司技術(shù)員對(duì)ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做欠好的原因做出分析：

1. 剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯：顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。

2. 酶濃度太高，導(dǎo)致zui終顯色結(jié)果都是高的。

3. 包被-酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或許酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強(qiáng)，或許酶標(biāo)儀讀數(shù)規(guī)劃不夠。

4. 樣本中有可以催化底物的物質(zhì)，沒洗下來(lái)。

5. 建議：包被、酶標(biāo)重新做梯度，先用較低的濃度把梯度探究好，然后再優(yōu)化靈敏度，zui終調(diào)出所需的靈敏度、線性規(guī)劃.

6. 有條件的話，可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上，加完底物三分鐘讀數(shù)。

7. 蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了。

8. 酶是自己標(biāo)的這種情況的，HRP比例不要太高。

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