如何更好的使用hplc色譜柱

來源：深圳市恒譜生科學儀器有限公司 2021年10月26日 11:40

?。薄⒛玫?strong>hplc色譜柱后先閱讀說明書，了解hplc色譜柱的具體性能：耐受溫度、耐受ＰＨ等。以及hplc色譜柱的沖洗和保存條件。經(jīng)過柱校測試確認hplc色譜柱本身沒有問題后方可正常使用。

　?。病悠烦浞智疤幚?，確保樣品的潔凈；使用保護柱或在線過濾器，根據(jù)實際情況更換保護柱芯或濾片。

　?。?、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。

　?。础饾u改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中如果流動相中使用了緩沖鹽，避免出現(xiàn)鹽析。

　?。怠⑦x擇使用適宜的流動相（尤其是PH），以避免固定相被破壞，PH過低共價鍵斷裂，鍵和相水解；PH過高硅膠溶解。

　?。?、hplc色譜柱使用過程中，如果壓力升高，或出現(xiàn)污染，選擇適當?shù)臈l件沖洗或反沖。

　　適用于C18、C8、C4、C1、苯基、PFP、AQ等

　　使用至少20倍柱體積的含有≥30%誰的極性郵寄溶劑（如乙腈）作為流動相除去柱子中的緩沖鹽；使用至少20倍柱體積的含有95%極性郵寄溶劑（如乙腈）沖洗hplc色譜柱。

　　污染物的去除常規(guī)星期后柱校沒有明顯恢復時，使用50%異丙醇／乙腈以低流速清洗20倍柱體積以除去污染物。（以上操作可根據(jù)實驗室自身SOP視情況而定，此方法僅為賽分針對自己品牌的反相hplc色譜柱沖洗的參考意見）

　　適用于氨基柱、氰基柱

　　常規(guī)清洗：乙腈：水＝60:40條件對hplc色譜柱進行沖洗，清洗時不建議水相比例超過40%，過高使用水相容易導致鍵和相水解。

　　hplc色譜柱再生：當hplc色譜柱經(jīng)過長期使用，柱校降低時，可以對hplc色譜柱進行再生，乙腈：水（水中加入0.05%氨水）＝60:40條件沖洗30倍柱體積。（以上操作可根據(jù)實驗室自身SOP視情況而定，此方法僅為賽分針對自己品牌的hplc色譜柱沖洗的參考意見）

　　適用于離子交換柱SCX、SAX沖洗方法

　　日常沖洗：用****水沖洗30個柱體積除鹽，然后用20%甲醇或乙腈沖洗20個柱體積后保存在20%甲醇或乙腈中。

　　長期保存：用****水沖洗30個柱體積去除鹽，然后用50%乙腈；50%水沖洗20個柱體積后保存在50%乙腈：50%水中。

　　再生：先用高濃度的緩沖鹽（不超過１Ｍ），然后再用****水洗，****乙腈或甲醇沖洗，再用20%乙腈或甲醇保存。（以上操作可根據(jù)實驗室自身SOP視情況而定，此方法僅為賽分針對自己品牌的hplc色譜柱沖洗的參考意見）

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