補體介導的細胞毒試驗

來源：深圳市安培生物科技有限公司 2021年11月01日 18:44

材料與儀器

小鼠
Hank's液抗小鼠Thy-1的單克隆抗體補體伊紅-Y染液
解剖器械平皿不銹鋼網(wǎng) 試管吸量管尖吸管載玻片蓋玻片

實驗步驟

1. 小鼠胸腺細胞懸液的制備

將 4～6 周齡小鼠采用頸椎脫臼法處死，取出胸腺放入已加入約4 ml冷Hank's液的平皿中，在100 目的不銹鋼網(wǎng)上研磨后，過篩，放入試管，離心1000 rpm，5 分鐘，用Hank’s液洗兩次。將沉淀的細胞重懸于Hank's液中，配成1×107 /ml細胞懸液。

2. 取試管3 支，標明順序，依據(jù)下表依次加入1×107 /ml胸腺細胞懸液、抗小鼠Thy-1 的單克隆抗體（最適稀釋度）及Hank's液，放入37 ℃水浴30 分鐘。

3. 取出后每管加入1 ％伊紅-Y 染液1 滴，混勻，室溫放置2 分鐘。

4. 重新混勻后分別在一張載玻片上滴片，加蓋玻片鏡檢。先在低倍鏡下觀察，再用高倍鏡觀察，比較3 管中細胞死活情況。

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