熒光定量基因擴(kuò)增儀的相關(guān)內(nèi)容介紹,這篇文章總結(jié)的很詳細(xì)了
熒光定量基因擴(kuò)增儀主要用于用于科研及臨床的基因擴(kuò)增、定性PCR基因擴(kuò)增、熒光/酶免終點(diǎn)定量DNA基因擴(kuò)增、基因芯片等其他基因分析應(yīng)用的基因擴(kuò)增等。基因擴(kuò)增儀適合國(guó)內(nèi)外各種PCR試劑盒傳染病類(lèi)、腫瘤類(lèi)、科研類(lèi)。進(jìn)口基因擴(kuò)增儀主要由外殼、變溫反應(yīng)腔、散熱系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)、制冷系統(tǒng)、電子控制系統(tǒng)、供電系統(tǒng)、人機(jī)界面等各部分組成?;驍U(kuò)增儀廣泛應(yīng)用于各級(jí)各類(lèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)、大學(xué)及研究所、CDC、檢驗(yàn)檢疫局、獸醫(yī)站、食品企業(yè)及乳品廠(chǎng)等。
熒光定量基因擴(kuò)增儀的工作原理:
PCR技術(shù)的本質(zhì)是體外核酸擴(kuò)增,加熱使雙鏈DNA解開(kāi)螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物,重復(fù)“變性→退火→引物延伸”過(guò)程至25-40個(gè)循環(huán),呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)大待測(cè)樣本中的核酸拷貝數(shù)。以不同溫度的水浴鍋串聯(lián)成一個(gè)控溫體系。樣品與水直接無(wú)縫接觸,控溫準(zhǔn)確,溫度均一性好,無(wú)邊緣效應(yīng)。體積大,自動(dòng)化程度不高,需人為干預(yù),更換水浴鍋時(shí)控溫不穩(wěn)定。
熒光定量基因擴(kuò)增儀(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技術(shù)在PCR反應(yīng)體系中加入特異性的熒光染料或探針,熒光信號(hào)的變化真實(shí)地反映了體系中模板的增加,通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào),從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR反應(yīng)過(guò)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析。
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