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你了解細(xì)胞株培育基的操作過程嗎

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2021年11月23日 08:59  

你了解細(xì)胞株培育基的操作過程嗎,公司產(chǎn)品系出名門,試劑盒原料如抗體對(duì)、標(biāo)準(zhǔn)品、通過嚴(yán)格的甄選,想要買到價(jià)格實(shí)惠的科研產(chǎn)品,急忙購(gòu)買晶抗公司的產(chǎn)品吧!細(xì)胞株培育基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,是供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培育液或培育基的含義幾乎相同,當(dāng)它是粉劑時(shí),傾向性地稱為培育基,而將粉劑配成液體后,多稱為培育液。培育液中常常補(bǔ)加血清、抗生素等成分。

你了解細(xì)胞株培育基的操作過程嗎
過程:

一、復(fù)蘇

1.把凍存管從液氮中取出來,當(dāng)即投入37℃水浴鍋中,細(xì)微搖擺。液體都融化后(大約1-1.5分鐘),拿出來噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺(tái)里。

2.把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培育基的15ml的離心管中(用培育基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來),1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

3.把上清液倒掉,加1ml培育基把細(xì)胞懸浮起來。吸到裝有10ml培育基的10cm培育皿中前后左右悄悄搖擺,使培育皿中的細(xì)胞均勻分布。

4.標(biāo)好細(xì)胞種類和日期、培育人姓名等,放到CO2培育箱中培育,細(xì)胞貼壁后換培育基。

5.3天換一次培育基。

二、傳代

1.培育皿中的細(xì)胞覆蓋率到達(dá)80%-90%時(shí)要傳代。

2.把原有培育基吸掉。

3.加適當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌?能覆蓋細(xì)胞就行),消化1-2分鐘。

4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培育基終止消化。

5.細(xì)胞株用移液槍吹打細(xì)胞,把細(xì)胞都懸浮起來。

6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中,1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7.倒掉上清液,加1-2ml培育基,把細(xì)胞都吹起來。

8.根據(jù)細(xì)胞種類把細(xì)胞傳到幾個(gè)培育皿中。一般,癌細(xì)胞分5個(gè),正常細(xì)胞傳3個(gè),繼續(xù)培育。

三、凍存

把細(xì)胞消化下來并離心(同上)。用配好的凍存液把細(xì)胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管中,停止幾分鐘,寫明細(xì)胞種類,凍存日期4℃30min,-20℃30min,-80℃過夜,然后放到液氮灌中保存。

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