ROC液相分析柱是色譜分析過程中最重要的部分,相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數(shù)將會(huì)造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實(shí)驗(yàn)室條件來選擇適合的色譜柱。
影響ROC液相分析柱性能的因素有哪些呢?
一、硅膠純度
硅膠純度對(duì)峰形有很大液相,硅膠雜質(zhì)和殘留的金屬離子會(huì)影響樣品的峰形,如果硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。恒譜生USHAC18色譜柱以全覆蓋的鍵合硅膠為填料,具有優(yōu)異的穩(wěn)定性、重復(fù)性、高選擇性和高分離度等特點(diǎn)。
二、顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻;不規(guī)則的顆粒柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動(dòng)相線速度不均勻,容易形成譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。恒譜生色譜填料均采用球形形狀,金屬雜質(zhì)<10ppm,具有柱效高和峰形好等特點(diǎn),可用于分離極性和堿性的有機(jī)化合物。
三、顆粒表面積
相對(duì)而言,高表面積對(duì)樣品具有較強(qiáng)的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達(dá)到平衡狀態(tài),更適合梯度洗脫程序。
除了以上這些因素,還有諸如鍵合類型及鍵合相、碳覆蓋率等因素影響。單體鍵合方式可以提高傳質(zhì)速率,縮短柱平衡時(shí)間;聚合體鍵合方式可以增加色譜柱穩(wěn)定性,增加載樣量。鍵合相的不同會(huì)直接影響化合物的保留行為。而高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現(xiàn)性,但分析時(shí)間長(zhǎng)。
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