RNase是生物體的“保護(hù)傘”，可防止外源RNA入侵。如：生物眼淚、唾液、汗液等體液中均會(huì)分泌RNase。

• 環(huán)境中的RNase穩(wěn)定性非常好

環(huán)境中存在的RNase主要是由微生物（細(xì)菌和真菌）所分泌，由一種微小緊湊的蛋白組成。它的結(jié)構(gòu)中具有二硫鍵，因此具有穩(wěn)定性極強(qiáng)的天然屬性，極難滅活，熱變性后也可以很快恢復(fù)構(gòu)象。并且，RNase耐熱、耐酸、耐堿，因此，它對(duì)眾多去污方法均具有抵抗作用。

由于RNase污染而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，如何有效檢測(cè)RNase污染源，是令實(shí)驗(yàn)人員頭疼的事情。建議從以下幾點(diǎn)進(jìn)行排查：

• 檢測(cè)緩沖體系、溶液：可啟用全新批次的RNase-free試劑測(cè)試比對(duì)，也可檢測(cè)疑似污染溶液中的RNase。

• 檢測(cè)RNA樣品：RNase進(jìn)入RNA樣本可在多種情況下發(fā)生，如RNA分離時(shí)（少量RNase在RNA制備過程中引入），或日常取用時(shí)（會(huì)不可避免地需要重復(fù)開關(guān)樣品管并插入可能被污染的加樣槍頭）。

• 可用GAPDH、cyclophilin、或beta-actin等管家基因的探針，通過northern分析來(lái)評(píng)估poly(A) RNA樣品的完整性。

RNase 抑制劑的類別較多，常用的RNase抑制劑有以下幾類：

翌圣生物科技（上海）股份有限公司（以下簡(jiǎn)稱“翌圣生物”）提供全面、高品質(zhì)、高性價(jià)比的分子酶原料。翌圣生物的鼠源RNase Inhibitor，可用于RT-PCR/RT-qPCR，解決體外轉(zhuǎn)錄中RNA降解問題，抑制RNA分離純化過程中RNase的活性。

產(chǎn)品特點(diǎn) ?

• 可以抑制RNase A、B和C

• 與 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶兼容

• 與人源RNase inhibitor相比，具有更高的抗氧化活性

• 適合于對(duì)高DTT敏感性實(shí)驗(yàn)(如RT-qPCR等)

活性定義 ?

抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。RNase A活性通過水解Cyclic 2’,3’-CMP生成3’-CMP定量求得。

部分案例展示 ?

在相同實(shí)驗(yàn)條件下，以qPCR方法分別對(duì)翌圣和R*公司的鼠源RNase抑制劑（MRI）的抑制效果進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果如下圖所示：

綜合以上結(jié)果，翌圣鼠源RNase抑制劑能有效抑制體系中的RNaseA，抑制效果優(yōu)于競(jìng)品。

翌圣生物持續(xù)致力于開發(fā)分子診斷酶原料，并為客戶提供相對(duì)應(yīng)的支持，努力為您的工作和公共衛(wèi)生事業(yè)做出貢獻(xiàn)。