ELISA試劑盒操作細(xì)節(jié)常見問題整理

來源：重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 2022年01月06日 15:47

1）問：是不是空白對(duì)照就是什么都不加？

答：不加樣本，不加樣本稀釋液，不加酶標(biāo)試劑，其他都可以加。

2）問：樣本稀釋液是配好的嗎？

答：樣本稀釋液是配好的。

3）問：樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎？

答：可以的，直接加40ul就可以了。

4）問：洗滌液是濃縮的；是一次配好，還是現(xiàn)配現(xiàn)用？謝謝。

答：濃縮的，現(xiàn)配現(xiàn)用。

5）問：加入的顯色液A\B分別是什么物質(zhì)？作用原理？

答：顯色劑A和B，是經(jīng)典的TMB顯色系統(tǒng)。具體原理可以參考免疫方面的教科書。在這里不詳細(xì)列出。

6）問：終止液是什么物質(zhì)？如何做到終止反應(yīng)的？

答：終止液是2mol的硫酸溶劑。終止反應(yīng)也是和原理相關(guān)。這個(gè)參考教科書！

7）問：稀釋液是什么成分？

答：標(biāo)準(zhǔn)稀釋液是PBS（PH=7.2-7.4，濃度是0.01mol/L）。樣本稀釋液是含有0.5%BSA的PBS（PH=7.2-7.4，濃度是0.01mol/L）。

8）問：需要避光保存的試劑是哪個(gè)？

答：需要避光的是顯色液B。

9）問：試劑盒從冰箱取出后，室溫放置會(huì)影響其效果嗎？

答：試劑盒在做實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該要室溫平衡一小時(shí)。短時(shí)間（3、4小時(shí)）沒有任何影響。

10）問：樣品研磨后是立即離心，還是在4度冰箱里提取幾個(gè)小時(shí)以后再離心？

答：樣本研磨后立即離心即可。

補(bǔ)充：5%BSA封閉液(BlockingBuffer)適用于WesternBlotting、ELISA以及免疫組化實(shí)驗(yàn)中非特異性蛋白結(jié)合位點(diǎn)的封閉。

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