濕熱滅菌的原理:是使微生物的蛋白質(zhì)及核酸變形導(dǎo)致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂,當(dāng)氫鍵斷裂時(shí),蛋白質(zhì)及核酸內(nèi)部結(jié)構(gòu)被破壞,進(jìn)而喪失了原有功能。濕熱滅菌法是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進(jìn)行滅菌的方法。以高溫高壓水蒸氣為介質(zhì),由于蒸汽潛熱大,穿透力強(qiáng),容易使蛋白質(zhì)變性或凝固,最終導(dǎo)致微生物的死亡,所以滅菌效率比干熱滅菌法高。濕熱滅菌是應(yīng)用廣泛的一種滅菌方法,它具有滅菌可靠,操作方便,易于控制和經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn),是藥物制劑生產(chǎn)過(guò)程中常用的滅菌方法。
濕熱滅菌法可分為:煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法
影響因素主要有:
1)細(xì)菌的種類(lèi)與數(shù)量:不同細(xì)菌的不同發(fā)育階段對(duì)熱的抵抗力有所不同。細(xì)菌數(shù)越少,滅菌時(shí)間越短。
2)蒸汽的性質(zhì):蒸汽有飽和蒸汽,濕飽和蒸汽和過(guò)熱蒸汽。飽和蒸汽熱含量較高,熱穿透力較大,因此滅菌效力高。濕飽和蒸汽帶有水分,熱含量較低,穿透力差,滅菌效力較低。過(guò)熱蒸汽溫度高于飽和蒸汽,但穿透力差,滅菌效率低。
流通蒸氣滅菌法:是指在常壓條件下,采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法,滅菌時(shí)間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌,但不能保證殺滅所有芽孢,是非可靠的滅菌方法。
間歇蒸汽滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法,但要重復(fù)3次以上,每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過(guò)夜,目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫,可將溫度降至75℃~80℃,加熱延長(zhǎng)為30~60分鐘,并增加次數(shù)。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。
高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達(dá)121.3℃,維持15-20分鐘。
濕熱滅菌法 濕熱法可在較低的溫度下達(dá)到與干熱法相同的滅菌效果,因?yàn)椋孩贊駸嶂械鞍孜账?,更易凝固變性;②水分子的穿透力比空氣大,更易均勻傳遞熱能;③蒸汽有潛熱存在,每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能,可迅速提高物體的溫度。
3)介質(zhì)的性質(zhì):制劑中含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如糖類(lèi)、蛋白質(zhì)等,增強(qiáng)細(xì)菌的抗熱性。細(xì)菌的生存能力也受介質(zhì)PH值的影響。一般中性環(huán)境耐熱性最大,堿性次之,酸性不利于細(xì)菌發(fā)育。
4)物品的性質(zhì)與滅菌時(shí)間:一般來(lái)說(shuō),滅菌溫度越高滅菌時(shí)間越短。濕熱滅菌法一般采用121℃,滅菌20-30min,如果是產(chǎn)孢子的微生物則應(yīng)采用滅菌后適宜溫度下培養(yǎng)幾小時(shí),再滅菌一次,以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。但考慮到被滅菌物的穩(wěn)定性,應(yīng)在達(dá)到有效滅菌的前題下可適當(dāng)降低滅菌溫度或縮短滅菌時(shí)間。
(1)流通蒸氣滅菌法:是指在常壓條件下,采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法,滅菌時(shí)間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌,但不能保證殺滅所有芽孢,是非可靠的滅菌方法。
(2)間歇蒸汽滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽加熱,殺滅所有微生物,包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法,但要重復(fù)3次以上,每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過(guò)夜,目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫,可將溫度降至75℃~80℃,加熱延長(zhǎng)為30~60分鐘,并增加次數(shù)。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。
(3)高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達(dá)121.3℃,維持15-20分鐘。
濕熱滅菌法 濕熱法可在較低的溫度下達(dá)到與干熱法相同的滅菌效果,因?yàn)椋孩贊駸嶂械鞍孜账?,更易凝固變性;②水分子的穿透力比空氣大,更易均勻傳遞熱能;③蒸汽有潛熱存在,每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能,可迅速提高物體的溫度。
濕熱滅菌法一般采用121℃,滅菌20-30min,如果是產(chǎn)孢子的微生物則應(yīng)采用滅菌后適宜溫度下培養(yǎng)幾小時(shí),再滅菌一次,以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。
(4)巴氏消毒法:利用病原體不是很耐熱的特點(diǎn),用適當(dāng)?shù)臏囟群捅貢r(shí)間處理,將其全部殺滅。
巴氏滅菌法主要為牛奶的一種滅菌法,既可殺死對(duì)健康有害的病原菌又可使乳質(zhì)盡量少發(fā)生變化。巴氏殺菌不可能殺死所有細(xì)菌,它只能將致病菌的數(shù)量降低到對(duì)消費(fèi)者不會(huì)造成危害的水平。巴氏滅菌法除牛奶之外,也可應(yīng)用于發(fā)酵產(chǎn)品
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