酶免法是酶聯(lián)免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA),它的中心就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合,然后通過顯色來檢測。用酶與指示劑的反應(yīng)來放大信號便于檢測。
就是用酶標(biāo)記抗原或抗體,抗原抗體反應(yīng)后加入酶的指示劑(酶的底物反應(yīng)后會(huì)顯色),顏色的深淺與抗原或抗體的量成正比。
金標(biāo)法也是標(biāo)記免疫的方法之一,用來作標(biāo)記物的是膠體金(氯金酸在還原劑的作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負(fù)電的疏水膠溶液,由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故稱為膠體金。)分為層析法和斑點(diǎn)滲透法。
以層析法為例:層析法一般采用雙抗原夾心法免疫測定原理,選擇經(jīng)純化的基因工程制備的抗原,分別作為包被抗原和膠體金結(jié)合抗原。當(dāng)待檢標(biāo)本中含有HIV抗體時(shí),先和金標(biāo)記抗原結(jié)合,由于層析作用反應(yīng)復(fù)合物沿硝酸纖維膜向前移動(dòng),當(dāng)遇到包被抗原時(shí),形成Ag-Ab-Ag-Au復(fù)合物富集在包被線上,形成紅色沉淀線。在包被膜上還有一條質(zhì)控線對照,故當(dāng)有兩條紅線時(shí)判為陽性,只有一條紅線時(shí),判為陰性。
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