羥基茶酚藍(lán)HNB染料使用說明
HNB變色染料
Cat. No.: A3822    Size: 500T
 
產(chǎn)品描述：
羥基茶酚藍(lán)（HNB)指示染料，可與Mg2+形成復(fù)合物，為紫羅蘭色。在 LAMP反應(yīng)中由于大量焦磷酸鹽的形成，焦磷酸鹽將螯合掉Ma2+。使得HNB的顏色變?yōu)樘焖{(lán)色，因此該試劑可作為LAMP反應(yīng)的指示染料，陽性擴增樣品為天藍(lán)色，而陰性仍然保持紫羅蘭色。HNB變色染料可與UDG LAMP防污染擴增試劑盒搭配使用從而建立可視化檢測方法。
 
羥基茶酚藍(lán)HNB染料使用說明方法:
1.該制品為凍干品形式，使用前使用0.2ml ddH₂O溶解后使用，溶解后使用為50×濃度。溶解前可保存于室溫，溶解后制品要保存在-20℃以下。
2.參考UDG LAMP防污染擴增試劑盒配制反應(yīng)體系在0.2ml EP反應(yīng)管中加入下述試劑：
10xIsothermo Buffer（Mg2+ free）        2μl   
Bst6.0 DNA/RNA Polymerase(8U/μl)     0.5~1μl  
10mM dUTP Mixture                      1.6μl  
溶解后的HNB染料（50x）                0.4μl  
100mM Mg2+                            1.2μl  
LAMP Primer Mix                         1-2μl  
模板DNA or RNA                           1μl  
ddH₂O到總體積                          20μl  
 
3. 反應(yīng)體系配好后，置于60~65℃（實驗采用60℃）進(jìn)行反應(yīng)30~60min。
 
存儲：RT
 
注意事項：
HNB搭配的最佳Mg2+濃度為6mM，即20μl 反應(yīng)體系中加入1.2μl 的Mg2+（10mM）。
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