WesternBlot有很多雜帶的原因分析

來源：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 2022年02月22日 10:12

1）目的蛋白有多個(gè)修飾位點(diǎn)，本身可以呈現(xiàn)多條帶，建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點(diǎn)信息，通過去修飾確定蛋白實(shí)際大小

2) 樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時(shí)在冰上操作

3）雜蛋白多，建議處理目的蛋白

4）抗體特異性不強(qiáng)，建議使用特異性強(qiáng)的抗體

5）抗體孵育時(shí)間過久，建議減少抗體孵育時(shí)間

6）二抗與抗原有交叉反應(yīng)，建議選擇合適的封閉物

7）二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強(qiáng)度

8）底物顯色與曝光時(shí)間過長，建議縮短顯色及曝光的時(shí)間

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