1.用PBS或適當?shù)木彌_液制備10-50 µM PI溶液。
2.向細胞培養(yǎng)物中加入體積為細胞培養(yǎng)基1/10的PI溶液。
3.在37oC下孵育細胞10-20分鐘。
4.用PBS或適當?shù)木彌_液洗滌細胞兩次。
5.使用熒光顯微鏡觀察細胞,激發(fā)波長為535 nm,波長為617 nm
排放過濾器。
碘化丙啶 PI在多色熒光應用:
碘化丙啶(PI)是細胞不可滲透的核酸嵌入染料。 由于PI被排除在活細胞之外,因此通常用于選擇性地對混合的活死細胞群體中的死細胞進行染色。
PI用作紅色熒光核酸染料;
PI與核酸結合后熒光增加20到30倍;
PI在所有類型的細胞中都具有死細胞特異性,包括哺乳動物細胞,細菌和酵母;
PI與流式細胞儀和熒光顯微鏡兼容。
進入細胞并與DNA和RNA結合后,PI的熒光增強20到30倍。 PI可用于流式細胞儀和熒光顯微鏡檢查。 PI還用作多色熒光成像的復染色,但是核特異性染色需要消化細胞RNA。
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