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肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

來源:上海雅吉生物科技有限公司   2022年03月02日 10:40  

 

肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

 

一、產(chǎn)品簡介:

肌酉酐(creatinine ,Cr)是人體或動物肌肉內代謝的產(chǎn)物,每20g肌肉代謝可產(chǎn)生約1mg肌酐,由腎小球濾過排出體外,外源性肌酐是肉類食物在體內代謝后的產(chǎn)物,內源性肌酐是體內肌肉組織代謝的產(chǎn)物。

雅吉生物肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點比色法)檢測原理是肌酐與鹽發(fā)生Jaffe反應,生成橘紅色的苦肌酐復合物,該復合物生成量與肌酐含量呈正比,通過酶標儀測定510nm 處吸光度,可用于檢測人體、動物的血漿、血清、尿液樣品中肌酐含量。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

 

二、產(chǎn)品組成:

名稱規(guī)格

50T

存儲

試劑(A):肌酐標準(10mmol/L)

1ml

4避光

試劑(B):肌酐標準稀釋液

10ml

RT

試劑(C):蛋白沉淀液

50ml

RT避光

試劑(D):Cr顯色液

5.5ml

RT

試劑(E): Cr Assay Buffer

5.5ml

RT

使用說明書

一份

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

三、自備材料:

1、1.5ml離心管、96孔板

2、離心機、酶標儀

3、蒸餾水

 

四、操作步驟(僅供參考)

1、準備樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備,-20℃凍存。取血清或血漿0.05ml,加入蛋白沉淀液0.45ml,充分混勻,靜置5min后3500r/min離心10min,取上清液,4℃保存待用;尿液中肌酐含量較高,應先用蒸餾水作50~200倍稀釋后再測。

2、配制標準品工作液︰取肌酐標準(10mmol/L),按肌酐標準(10mmol/L)∶肌酐標準稀釋液=1:99的比例混合,使?jié)舛冗_到100μmol/L,即為標準品工作液-肌酐標準(100μmol/L);4保存,1周有效。

3、Cr加樣:按照下表設置空白孔、標準孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的Cr濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。

 

 

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

加入物(μl)

空白

標準

測定

蒸餾水

150

肌酐標準(100μmol/L)

150

血清無蛋白濾液或稀釋尿液

150

Cr顯色液

50

50

50

Cr Assay Buffer

50

50

50

 

4、Cr檢測︰充分混勻,室溫放置15min,酶標儀檢測510nm吸光度,空白孔調零,讀取各孔吸光度,分別為A標準、A測定。

 

計算:

 

血清(漿)肌西酐(μmol/L)=(A測定/A標準)×100

尿液肌西(μmol/d)=(A測定/A標準)×100×N×24h尿量(L)

式中

A測定=測定孔的吸光度

A標準=標準孔的吸光度

N=尿液稀釋倍數(shù)

內生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)

校正的內生肌酐清除率值(L/24h)=內生肌酐清除率值×1.73/體表面積(m2)

注︰以正常人24h內生肌酐清除率值為128L(即24h 內有128L血液中的肌酐通過腎臟被清除)作為*,則內生肌酐清除率(%)=校正的內生肌酐清除率值×100/128(或0.78)

單位換算:d=24h

 

參考區(qū)間:

健康成年男性血清肌酐

44~133μmol/L(0.5~1.5mg/dl)

健康成年女性血清肌酐

70~106μmol/L(0.8~1.2mg/dl)

健康成年男性肌斷清除率值

10520ml/min

健康成年女性肌酐清除率值

9520ml/min

注意事項:

1、測定各孔時,各孔溫度均需達到室溫,否則影響結果。

2、輕度溶血樣本對肌酐測定無影響﹔尿液樣品中肌酐含量較高,樣品需做50~200倍稀釋,如果顯色后吸光度仍較高,還需將尿液繼續(xù)擴大稀釋倍數(shù),重新檢測。

3、呈色后標準管吸光度較穩(wěn)定,但測定管吸光度隨時間延長而增加﹔另外肌酐濃度越高,吸光度變化越快,因此加入顯色劑后30min內完成檢測為宜。

4、以標準品做梯度實驗,200μmol/L以下濃度呈不同程度的黃色-橙黃色,超過200μmol/L顏色逐漸加深,呈橘紅色,到1000μmol/L呈深橘紅色;用酶標儀測定100μmol/L,吸光度值在0.3左右。

有效期:12個月有效。

附錄標準曲線制作:在室溫條件下按說明書操作,用酶標儀505nm對標準梯度進行吸光度的測定,其數(shù)值及標準曲線如下(僅供參考)︰

Cr(μm)

0

20

50

100

150

200

400

700

1000

吸光度

0.059

0.107

0.183

0.303

0.438

0.544

1.033

1.731

2.454

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

 

 

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