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Gilson固相萃取儀的具體操作流程介紹
Gilson固相萃取儀將固相萃取的各個(gè)步驟有效的集成于一個(gè)平臺(tái)，可*實(shí)現(xiàn)整個(gè)固相萃取過(guò)程(活化、上樣、淋洗、干燥、洗脫)的全自動(dòng)操作，大大提高了樣品前處理的效率，將分析工作者從繁瑣的前處理工作中解脫出來(lái)，使樣品前處理更快捷、高效。
Gilson固相萃取儀操作流程：
1.選擇小柱或?yàn)V膜
小柱或?yàn)V膜的大小與規(guī)格應(yīng)視樣品中待測(cè)物的濃度大小而定。對(duì)于濃度較低的體內(nèi)樣品,一般應(yīng)選用盡量少的固定相填料萃取較大體積的樣品。
2.活化
萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml溶劑沖洗濾膜使填料保持濕潤(rùn),因?yàn)樘盍细稍飼?huì)降低樣品保留值，而各小柱的干燥程度不一,也會(huì)影響回收率的重現(xiàn)性。
3.上樣
一般可采取以下四種方法：
(1)用0.1mol/L酸或堿調(diào)節(jié),使pH<3或pH>9,離心取上層液萃取；
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,以水或緩沖液稀釋后萃??；
(3)用酸或無(wú)機(jī)鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,調(diào)節(jié)pH值后萃?。?/div>
(4)超聲15min后加入水、緩沖液,取上清液萃取。流速應(yīng)控制為1ml/min,流速快不利于待測(cè)物與固定相結(jié)合。
4.淋洗
反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液,可在清洗液中加入少量有機(jī)溶劑、無(wú)機(jī)鹽或調(diào)節(jié)pH值。加入小柱的清洗液應(yīng)不超過(guò)一個(gè)小柱的容積,而SPE濾膜為5～10ml。
5.洗脫
應(yīng)選用5～10ml離子強(qiáng)度較弱但能洗下待測(cè)物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度,則可先將洗脫液揮干后,再用流動(dòng)相重組殘留物后進(jìn)樣。體內(nèi)樣品洗脫后多含有水,可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測(cè)物,再用極性較強(qiáng)的HPLC分析柱分析洗脫物。
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