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PrimaCell™人子宮平滑肌細(xì)胞試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟

來(lái)源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司   2022年03月14日 16:23  

PrimaCell™人子宮平滑肌細(xì)胞試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟:

a.采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。   

b.立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。 

c.用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。   

d.用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。   

e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。   

f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):

用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性,在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代,一般3~4 天傳代一次。

懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代:

直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞,一般按1:2-1:5 稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

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