熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡是一種較為常用的的光學(xué)顯微鏡,其基本原理是利用一定波長的激發(fā)光對樣品進行激發(fā),使之產(chǎn)生一定波長的熒光,從而用于對樣品結(jié)構(gòu)或其組分進行定性、定位、定量觀察檢測。采用紫外光線照明的顯微鏡,它要求配置特殊的能提供紫外光的光源和濾光裝置。使用時,紫外光并不直接進入觀察者的眼睛,而是激發(fā)標本中的熒光物質(zhì)或經(jīng)熒光浸潤染色的標本。觀察時效果與暗場顯微鏡相似,是在黑暗背景中顯現(xiàn)出標本明亮的熒光圖像。
熒光顯微鏡檢測物質(zhì)的能力非常高,并且具有放大作用;被檢測物質(zhì)對細胞的刺激很小,可以檢測出生物體的染色體。并且可以執(zhí)行多個步驟。熒光素的結(jié)構(gòu)觀察非常好,普通顯微鏡是不可見的。另外,判斷某些物質(zhì)是否具有熒光,判斷為哪種色調(diào)是熒光,是否觀察到抗體的熒光。該顯微鏡可用于對物體進行定性和定量分析。
一般情況下,單獨使用熒光顯微鏡即可以達到我們想要的成像效果,但在某些情況下,比如說當(dāng)熒光比較微弱的情況下,僅僅通過熒光顯微鏡并不能達到理想的拍攝效果,或者我們希望可以將拍攝的熒光圖片上傳的電腦生面預(yù)覽,修改甚至發(fā)表學(xué)術(shù)論文,這時候沒有熒光顯微鏡CCD是不能達到要求的。
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