一、薄層色譜操作
?、胖瓢?以硅膠板為例)
選擇合適的玻璃板(經(jīng)常使用顯微鏡上的載玻片),依次用水和乙醇洗凈,晾干。取適量薄層色譜用的硅膠,加適量蒸餾水調(diào)成糊。調(diào)制時(shí)慢慢攪拌,勿使產(chǎn)生氣泡。將糊倒在玻璃板上,搖動攤平,晾干。使用前放入烘箱內(nèi),在105-115oC左右烘干40-50分鐘。冷卻后使用。
⑵點(diǎn)樣
將試樣用最少量展開劑溶解,用毛細(xì)管蘸取試樣溶液,在薄層板上點(diǎn)樣。在樣點(diǎn)上輕輕畫出一條平行于玻璃板底邊的細(xì)線。薄層色譜板載樣量有限,勿使點(diǎn)樣量過多。
?、钦归_
吹干樣點(diǎn),豎直放入盛有展開劑的有蓋展開瓶中。展開劑要接觸到吸附劑下沿,但切勿接觸到樣點(diǎn)。蓋上蓋子,展開。待展開劑上行到一定高度(由試驗(yàn)確定適當(dāng)?shù)恼归_高度),取出薄層板,再畫出展開劑的前沿線。
?、蕊@色,計(jì)算Rf值
揮發(fā)干展開劑,選擇合適的顯色方法顯色。量出展開劑和各組分的移動距離,計(jì)算各組分的相對移動值。
二、薄層色譜應(yīng)用
⑴可用于判斷兩個(gè)化合物是否相同(同一展開條件下是否有相同的移動值);
?、瓶捎糜诖_定混合物中含有的組分?jǐn)?shù);
?、强捎糜跒橹V選擇合適的展開劑,監(jiān)視柱色譜分離狀況和效果;
?、瓤捎糜跈z測反應(yīng)過程。
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