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收到293 [HEK-293]細胞后如何操作?

來源:武漢普諾賽生命科技有限公司   2022年04月21日 12:27  

293 [HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞,293 [HEK-293]細胞包含并表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出,293 [HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主,可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

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1.首先,觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請及時與Procell技術支持聯(lián)系。

2.用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng),隔天再取出進行觀察。

3.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

4.可將培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基轉移至50ml無菌離心管中,備用;細胞傳代時,可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

5.確認細胞狀態(tài)良好后,應及時將細胞凍存,再進行后續(xù)的實驗,避免后期實驗失誤可能發(fā)生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失。

6.建議客戶收到細胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和Procell技術支持溝通交流。


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