H9C2轉(zhuǎn)染、大鼠心肌細(xì)胞--上海轉(zhuǎn)染生物ZetaLife

貼壁細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染步驟：

1、質(zhì)粒提取：使用無內(nèi)毒素提取試劑盒

2、質(zhì)粒溶解：溶于超純水或雙蒸水，一定不能溶于試劑盒Buffer等其他試劑

3、質(zhì)粒熒光：若質(zhì)粒不帶熒光、請使用熒光對照，方便查看轉(zhuǎn)染效率

4、質(zhì)粒濃度：500-600ng/ul

5、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物制備：取質(zhì)粒8ug和轉(zhuǎn)染試劑8ul混合，吹打混勻室溫靜置15分鐘，無需另外加入任何試劑稀釋

6、細(xì)胞轉(zhuǎn)染前狀態(tài)：拍照片留存

7、貼壁細(xì)胞鋪板：6孔板*培養(yǎng)基2ml、培養(yǎng)基中不加雙抗，細(xì)胞密度：60%左右

8、轉(zhuǎn)染：將復(fù)合物加入輕搖混勻、培養(yǎng)箱培養(yǎng)

9、換液：轉(zhuǎn)染24小時(shí)后培養(yǎng)基換液

10、轉(zhuǎn)染效率：轉(zhuǎn)染48小時(shí)后拍熒光照片，查看轉(zhuǎn)染效率

11、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀態(tài)：拍明場細(xì)胞狀態(tài)照片

12、檢測：總計(jì)轉(zhuǎn)染48小時(shí)后提取RNA或蛋白檢測

?ZetaLife Advanced DNA/RNA Transfection Reagent優(yōu)秀特點(diǎn)：

1、轉(zhuǎn)染效率高：新型高分子材料載量大、體積大小是脂質(zhì)體的1/10、進(jìn)入細(xì)胞能力強(qiáng)

2、無細(xì)胞毒性：進(jìn)入細(xì)胞后可以被代謝成水和二氧化碳的轉(zhuǎn)染試劑

3、不激活細(xì)胞表面或細(xì)胞體內(nèi)marker，不激活細(xì)胞免疫機(jī)制

4、對細(xì)胞膜無物理性損傷，不易出現(xiàn)細(xì)胞變形、利于細(xì)胞保持較高活力

5、可反映真實(shí)的細(xì)胞通路蛋白原始數(shù)據(jù)

6、操作簡單：含血清*培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染、無需4-6h換無需購買無血清培養(yǎng)

7、可高效率轉(zhuǎn)染siRNA到任何干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞及細(xì)胞系

上海轉(zhuǎn)染生物科技有限公司是服務(wù)于高校和科研院所生命科學(xué)研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、生物制品生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療等領(lǐng)域高科技生物技術(shù)企業(yè)。提供的第三代高分子、細(xì)胞內(nèi)可代謝的轉(zhuǎn)染試劑，解決了難轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染毒性大致細(xì)胞死亡多、需要無血清環(huán)境的這些問題，比如：RAW264.7、THP-1、精原干細(xì)胞、IPS細(xì)胞、BMDM、MT-4人淋巴T細(xì)胞、SW480、A549、U87細(xì)胞等；提供的活體動(dòng)物可代謝體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑，可轉(zhuǎn)染長片段質(zhì)粒DNA至體內(nèi) 可通過靜脈注射或體內(nèi)局部組織注射的簡單方式完成轉(zhuǎn)染過程; 提供的無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物制品生產(chǎn)公司提供無血清的細(xì)胞規(guī)模生產(chǎn)支持；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列人源化、細(xì)胞培養(yǎng)可分解的3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品等。

美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染的第三代高分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。