手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
雙槽梯度PCR儀其實就是將多個的PCR反應放在一起做，不用一次一次的作很多次，可以很快的找出適合的退火溫度，或者說可以在適合的退火溫度下擴增出目的條帶。除具標準PCR儀功能外，其梯度模塊還能同時進行多個不同退火溫度的PCR反應，在梯度模塊上，可實現(xiàn)對梯度溫度和梯度寬度等參數的調整，自由編程溫度，梯度實現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時進行熱循環(huán)。僅一次實驗就能確定特定體系相應的退火溫度。從而可在短時間內對PCR實驗進行優(yōu)化，大大提高PCR科研效率。
雙槽梯度PCR儀的常見問題及現(xiàn)場解決方案如下：
1、梯度PCR儀在產物序列中引入了錯誤，這大多是由于聚合酶忠實性低或者循環(huán)數太多，這時需要使用帶有校正活性的熱穩(wěn)定聚合酶，同時降低循環(huán)數。此外，四種dNTP的濃度不同也會出現(xiàn)該問題，此時應制備新的濃度相同的dNTP混合物。
2、PCR跑膠，目的條帶很亮，但是邊沿不清楚，前后有拖尾現(xiàn)象。出現(xiàn)這樣的問題，則需要進行細致的分析，因為引起該問題的可能很多?？上葯z查是否模板質量問題，如有降解等，模板應避免反復凍融。也有可能是抽提RNA時有污染，則需要重新抽提RNA。此外，也可能是非特異性擴增引發(fā)該問題，可提高退火溫度，少循環(huán)次數。電泳緩沖液時間太長，ph值和鹽離子濃度明顯改變、電泳時電壓太高、電泳液過久沒換，電泳膠臟了等都可能引發(fā)該問題。如果不是由上述原因引起，則進一步檢查加樣量是否過大，制膠過程中膠孔是否制好，EB是否沖洗干凈、模板中是否混有基因組DNA或蛋白等。也需考慮是否擴增的條件不合適。針對具體原因再采取相應的措施。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。
采購中心