如何使用熱板測痛儀評(píng)價(jià)動(dòng)物神經(jīng)疼痛模型
如何使用熱板測痛儀評(píng)價(jià)動(dòng)物神經(jīng)疼痛模型
一.熱板法實(shí)驗(yàn)
熱板法是鎮(zhèn)痛藥物篩選中常用的一種方法,也是一種能確定區(qū)分中樞神經(jīng)末梢神經(jīng)鎮(zhèn)痛機(jī)理的方法,有較廣的使用范圍,熱板法對(duì)動(dòng)物組織損傷最小,動(dòng)物可反復(fù)使用,痛反應(yīng)潛伏期較長,便于觀察及測出藥物之間的較小差異,比較出藥物作用的強(qiáng)弱快慢及持續(xù)時(shí)間。
二、實(shí)驗(yàn)儀器
智能熱板儀通過測試大鼠和小鼠的疼痛反應(yīng)時(shí)間,進(jìn)行快速精確地篩選麻醉型鎮(zhèn)痛藥物。如針對(duì)一組大鼠,在服用藥物前,測量該組大鼠在熱盤上舔爪的平均時(shí)間,該時(shí)間對(duì)應(yīng)的是大鼠對(duì)熱刺激的反應(yīng)時(shí)間,在服用鎮(zhèn)痛或麻醉藥物后,測量該組大鼠在熱盤上舔爪的平均時(shí)間,該時(shí)間對(duì)應(yīng)的是大鼠服用藥物后對(duì)熱刺激的反應(yīng)時(shí)間,對(duì)兩組時(shí)間值的比較,評(píng)估鎮(zhèn)痛或麻醉藥物對(duì)大鼠的效果。該產(chǎn)品適用于大、中專醫(yī)科院校、科研單位進(jìn)行藥理鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)教學(xué)及科研工作。
三.實(shí)驗(yàn)方法
1、實(shí)驗(yàn)前預(yù)篩選:以小鼠為例,取若干只小鼠,實(shí)驗(yàn)前24h腹部去毛,將小鼠逐只置于(55.0±0.5)℃熱板儀上,測定記錄小鼠的痛閾值,以舔后足為痛覺指標(biāo),挑選痛閾值為5~30s的小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
2、給藥前痛閾值的測定:將篩選出的小鼠逐只置于熱板儀上,各測2次痛閾(間隔10min),取平均值作為小鼠基礎(chǔ)痛閾即給藥前的正常痛閾值。
3、給藥后痛閾值的測定:在服用鎮(zhèn)痛或麻醉藥物后,測量小鼠在熱盤上舔爪的平均時(shí)間,該時(shí)間對(duì)應(yīng)的是小鼠服用藥物后對(duì)熱刺激的反應(yīng),作為給藥后痛閾值。若小鼠在熱板儀上60s內(nèi)仍無痛覺反應(yīng),立即取出按60s計(jì)算并統(tǒng)計(jì)給藥前后的痛閾值。
4、痛閾提高的百分率:對(duì)兩組時(shí)間值的比較,評(píng)估鎮(zhèn)痛或麻醉藥物的效果。
計(jì)算方式:痛閾提高的百分率=[(給藥后的痛閾-基礎(chǔ)痛閾)/基礎(chǔ)痛閾]×100%。
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