rnase是什么酶? RNase A作用是什么?
rnase是什么酶?RNase屬于核糖核酸酶,它是分子生物學(xué)中常見(jiàn)到的一種酶,這種酶容易對(duì)核酸實(shí)驗(yàn)造成污染,所以在實(shí)驗(yàn)中會(huì)竭力地避免。實(shí)質(zhì)上RNase的作用有很多,它對(duì)于生物體的生存也是重要的。
一、自然界中RNase 的作用
真核生物、古細(xì)菌和細(xì)菌中至少存在 21 種類(lèi)型的 RNA 酶,它們?cè)跈C(jī)體中發(fā)揮著重要的作用。比如:
RNase H具有去除 DNA 復(fù)制中的 RNA 引物的作用。
RNase P具有處理 tRNA 分子的功能。
RNase A主要負(fù)責(zé)清除不再需要的細(xì)胞 RNA,這些 RNA 由生物機(jī)體內(nèi)的某些細(xì)胞大量分泌。
RNase L是人體免疫屏障的防線之一,對(duì)于入侵細(xì)胞內(nèi)的 RNA 具有破壞作用,以應(yīng)對(duì)病毒感染。
二、實(shí)驗(yàn)室中的RNase
實(shí)驗(yàn)室中的主要用于RNA的切割、降解等實(shí)驗(yàn)的rnase是什么酶,主要有哪些作用和特點(diǎn)呢?
1.哺乳動(dòng)物RNase A的作用及特點(diǎn)
哺乳動(dòng)物RNase A是研究中常用的 RNase。
l 特異于所有單鏈 RNA,
l 在 C 和 U 殘基后切割
l 在切割過(guò)程中,一系列分子內(nèi)二硫鍵即使在變性后也能部分保持 3D 結(jié)構(gòu),從而使酶保持一些活性。
l 在 DNA 純化過(guò)程中降解 RNA
l 有時(shí)會(huì)與真菌 RNase、RNase T1 結(jié)合使用。
2.來(lái)自大腸桿菌的 RNase I作用和特點(diǎn)
l 實(shí)驗(yàn)中,來(lái)自于大腸桿菌的 RNase I主要作用是降解單鏈RNA
l 切割位點(diǎn)是在所有 4 個(gè)核苷酸后切割
l 與 RNase A 不同,RNase I 可以通過(guò)將樣品加熱至 70°C 來(lái)滅活
3.來(lái)自真核生物的 RNase H的作用及特點(diǎn)
l 具有切割 DNA:RNA 雜交體中的 RNA 的*能力,只留下單鏈 DNA。
l 主要用于創(chuàng)建 cDNA 以去除 RNA 模板的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),
l 常應(yīng)用于核酸酶保護(hù)試驗(yàn)。
4.來(lái)自真菌的 RNase T1
l 它可以有效地降解單鏈RNA
l 在 G 殘基后特異性切割單鏈 RNA。
l 可以被洗滌劑激活
l 在實(shí)驗(yàn)室中用于在測(cè)序前破壞變性的 RNA
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