His-tag 標(biāo)簽的蛋白純化是迄今為止在生物學(xué)和生物化學(xué)中常用的技術(shù)之一。然而，這種技術(shù)并非沒(méi)有其局限性，常見(jiàn)的his-tag標(biāo)簽純化技術(shù)，如Ni-NTA，與蛋白酶抑制劑或還原劑等緩沖液中常用的物質(zhì)不相容。我們研發(fā)的INDIGO配基取代了傳統(tǒng)的NTA或IDA配基。

INDIGO產(chǎn)品的優(yōu)勢(shì)

Figure 1: His-tag protein purification using INDIGO-Ni agarose beads 

INDIGO是什么?

INDIGO是一種新開(kāi)發(fā)的配基，可將二價(jià)金屬離子與瓊脂糖微球結(jié)合，類似于NTA或IDA。

然而，INDIGO相對(duì)能比NTA和IDA更牢固地結(jié)合金屬離子，從而帶來(lái)了多種優(yōu)勢(shì)和好處，同時(shí)維持與NTA或IDA產(chǎn)品相同的純化流程和方案。

DTT/還原劑穩(wěn)定性

Figure 2: INDIGO beads are immune to the side-effects of reducing agents like DTT

在蛋白純化過(guò)程中，保護(hù)蛋白的結(jié)構(gòu)是非常重要的。這包括結(jié)構(gòu)元素，如：二硫鍵。在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中，可以將DTT等還原試劑添加到純化緩沖液中，以保護(hù)這些結(jié)構(gòu)。然而，Ni-NTA或Ni-IDA不允許這種情況，因?yàn)檫@樣會(huì)使金屬離子也因此而減少。

但INDIGO卻不同，因?yàn)?/span>INDIGO至少有20mM的還原劑耐受性。

蛋白酶抑制劑穩(wěn)定性

為了提高蛋白純化的產(chǎn)率，可以向純化緩沖液中添加蛋白酶抑制劑。這些通常是螯合劑，如：EDTA。然而，它們也會(huì)剝離Ni-NTA和Ni-IDA瓊脂糖微球的金屬離子，因此不能正常用于His標(biāo)簽純化。

INDIGO可以解決這樣的情況，因?yàn)樗哂兄辽?/span>20mM的螯合劑耐受性，從而消除了這個(gè)限制！
 

 Cube Biotech的INDIGO產(chǎn)品

INDIGO產(chǎn)品線涵蓋幾種蛋白質(zhì)純化方式的產(chǎn)品：