DNA基因合成儀主要用于基因合成、構(gòu)建克隆及基因組變體文庫合成,按用途可以分為三類:
工業(yè)型合成儀合成通量較大,主要用于大型生物實驗室以及商業(yè)機(jī)構(gòu)中;
實驗室型合成儀合成通量較小,主要用于生物實驗室中;
大規(guī)模合成型合成儀可進(jìn)行規(guī)模化量產(chǎn),主要用于生物醫(yī)藥原料藥制備領(lǐng)域。隨著基因治療以及生物醫(yī)藥行業(yè)快速發(fā)展,預(yù)計未來工業(yè)性以及大規(guī)模合成型DNA合成儀需求增速將加快。
DNA基因合成儀合成產(chǎn)物的回收純化方式:
合成儀上合成的粗產(chǎn)物,使用濃氨水將寡核苷酸鏈從載體CPG上化學(xué)切割下來并脫去堿基環(huán)上的保護(hù)基團(tuán),再使用各種純化方式去除合成過程中形成的短片段,得到合乎要求的DNA片段。合成后的處理步驟:
1.切割:將合成好的寡核苷酸鏈從支持物上化學(xué)切割下來。
2.脫保護(hù)基:須在此步前選好后續(xù)的純化方法。一般用新鮮的濃氨水處理較長時間以脫掉腈乙基、苯甲?;?、異丙基,用三氟乙*脫5’-DMT.
3.純化:根據(jù)所合成寡核苷酸的組成和應(yīng)用來選定純化的方法。
4.定量:根據(jù)寡核苷酸在260nm處的紫外吸收來定量。
5.儲存:需要注意的是避免紫外線等劇烈的物理環(huán)境,避免反復(fù)凍融,-20℃可穩(wěn)定保存一年以上。
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