口蹄疫O型正向血凝抗體檢測(cè)試劑盒檢驗(yàn)步驟和方法
口蹄疫O型正向血凝抗體檢測(cè)試劑盒由預(yù)包被口蹄疫O型抗體的酶標(biāo)板、抗體工作液、抗原液酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用阻斷酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)牛、羊、豬血清樣本中口蹄疫O型抗體。用于檢測(cè)牛、羊、豬血清中口蹄疫O型抗體,可用于口蹄疫O型疫苗免疫效果評(píng)價(jià)及輔助診斷。
口蹄疫O型正向血凝抗體檢測(cè)試劑盒檢驗(yàn)步驟和方法:
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘以上,恢復(fù)至室溫(20-25℃)。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。并用稀釋好的洗滌液清洗兩遍。
3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液50 μL;陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照50 μL;每個(gè)孔中加入50μL的酶標(biāo)記物,輕微震蕩混合均勻,37℃孵育30分鐘。
4.棄去反應(yīng)液,每孔加入200μL洗滌液,無(wú)需靜置,甩掉孔中洗滌液,重復(fù)清洗5遍,最后在干凈的吸水紙上拍干。
5.每孔加入底物液100μL,室溫避光顯色15分鐘。
7.每孔加入終止液50 μL,混勻,在10分鐘內(nèi),用450 nm波長(zhǎng)(可用630 nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(OD值),無(wú)參比波長(zhǎng)用空白孔調(diào)零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值)。
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