在細胞培養(yǎng)中你知道如何消除組織培養(yǎng)的污染嗎

當重要的培養(yǎng)污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。下面是我司推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟：

1. 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。

2. 分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內，把選擇抗生素加入到每一個孔中。

3. 每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。

4. 確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2～3代。

5. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。

6. 重復步驟4。

7. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代，確定污染是否以已被消除。

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